本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测原理,针对大鼠IL-2可溶性受体特异性抗原位点,在微孔板上包被对应的捕获抗体,样本中的IL-2sR抗原可与固相抗体特异性结合,洗涤后加入酶标记的特异性检测抗体,形成稳定的免疫夹心复合物,通过底物酶促显色反应产生特异性颜色变化,显色强度与样本中IL-2sR的浓度呈正相关,终止显色后检测吸光度,结合标准曲线即可定量分析大鼠样本中IL-2sR的含量水平。
基本参数:

产品名称:大鼠白介素2可溶性受体(IL-2sR)ELISA试剂盒
英文名称:IL-2sR ELISA Kit
货号:Y-E1026
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测浓度≤1.5pg/mL
检测范围:4pg/mL - 1200pg/mL
反应时间:总反应时长4.2小时,37℃恒温孵育
保存条件:试剂盒2-8℃保存,浓缩洗涤液室温保存
有效期:未开封有效期6个月,稀释后工作液当日用完
显色系统:经典TMB-HRP显色系统,反应灵敏、底色低
检测波长:450nm/630nm双波长检测,消除孔底误差
标准曲线绘制:7个浓度梯度标准品,四参数Logistic回归拟合曲线
特异性:特异性结合大鼠IL-2可溶性受体,不结合膜型IL-2受体及其他受体蛋白
重复性:板内CV≤8.5%,板间CV≤10.5%
注意事项:样本避免溶血、脂血,否则干扰检测结果;标准品稀释精准,避免浓度偏差;孵育全程密封保湿,防止孔内液体蒸发
关键注意事项:

本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
实验步骤如下:

IL-2sR 冻干标准品复溶梯度稀释,试剂盒室温平衡 30min,划分酶标板孔位;
各微孔依次加入 50μL 梯度标准品、大鼠待测组织匀浆上清,空白孔补稀释液;
每孔添加 100μL 辣根酶标记抗 IL-2sR 抗体,密封酶标板避免液体挥发;
37℃避光孵育 60min,一步共孵育形成抗原酶标抗体复合物;
弃液后洗涤缓冲液浸泡微孔 40s,拍干,连续洗板 5 次;
避光加入显色底物 A、B 液各 50μL,37℃避光显色 14min;
终止液终止显色,混匀后 450nm 测 OD 值,对照标准曲线计算 IL-2sR 含量。
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