大鼠甘露糖结合蛋白/甘露糖结合凝集素(MBP/MBL)ELISA试剂盒

本试剂盒运用双抗体夹心ELISA检测技术，预先在酶标板包被大鼠MBP/MBL特异性捕获抗体，加入梯度标准品和待测大鼠血清样本，样本中的MBP/MBL抗原与固相抗体特异性结合，洗板去除未结合杂质，加入酶标记的MBP/MBL检测抗体，形成夹心免疫复合物，经洗涤后显色底物反应，显色强度与样本抗原含量正相关，终止后通过标准曲线完成定量检测。
基本参数‌：

产品名称：大鼠甘露糖结合蛋白/甘露糖结合凝集素(MBP/MBL)ELISA试剂盒

英文名称：MBP/MBL ELISA Kit
货号：Y-E1010

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测限0.1ng/mL，可精准检测大鼠血清、肝组织中MBP/MBL含量

检测范围：0.3ng/mL～28ng/mL，适配大鼠免疫、肝损伤模型检测

反应时间：总时长115分钟，孵育85分钟，显色30分钟

保存条件：2～8℃避光冷藏，酶标板防潮密封存放

有效期：原装有效期6个月，开封后30天内使用

显色系统：稳定型TMB显色系统，显色均匀无偏差

检测波长：450nm主波长，570nm校正波长

标准曲线绘制：6梯度标准浓度，四参数拟合，R²≥0.994

特异性：特异性识别大鼠MBP/MBL，与其他凝集素、结合蛋白无交叉反应

重复性：板内CV≤4.4%，板间CV≤6.4%

注意事项：血清样本避免脂血、溶血；试剂平衡室温后操作；孵育保湿避光；洗涤彻底，避免残留杂质影响结果。
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

试剂盒试剂室温静置 37min，洗涤缓冲液 1:29 稀释，大鼠血清样本去除浑浊脂质层。

微孔板分孔添加 100μL MBL 梯度标准蛋白、大鼠血清、空白稀释液。

一步法酶结合混合液 200μL 每孔，避光 37℃孵育 85min。

洗涤浸泡 49s，洗涤 5 次，吸干微孔水分。

单一显色底物避光孵育 20min。

终止液中和显色，轻摇酶标板混匀。

酶标仪 450nm 测 OD，计算大鼠 MBL 凝集素含量。
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