本试剂盒基于双抗体夹心ELISA检测原理,酶标板包被大鼠HGF特异性单克隆抗体,加入标准品与待测大鼠组织、血清样本,样本中的HGF抗原与固相抗体特异性结合,洗涤去除非特异性结合物质,加入辣根过氧化物酶标记的HGF检测抗体,形成稳定的夹心免疫复合物,洗涤后底物显色,终止后检测吸光度,对照标准曲线精准定量样本中HGF的含量。
基本参数:

产品名称:大鼠肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒
英文名称:HGF ELISA Kit
货号:Y-E1550
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测限0.08ng/mL,可检测大鼠肝组织、血清中低浓度HGF
检测范围:0.15ng/mL~20ng/mL,适配大鼠肝损伤、肝再生模型检测
反应时间:总时长110分钟,孵育80分钟,显色30分钟
保存条件:2~8℃避光冷藏,生长因子类试剂严禁冷冻
有效期:原装有效期6个月,开封后25天内使用完毕
显色系统:高灵敏TMB显色系统,适配细胞因子微量检测
检测波长:450nm检测,630nm校正
标准曲线绘制:7梯度标准浓度,四参数拟合,R²≥0.993
特异性:特异性结合大鼠HGF,与EGF、VEGF等生长因子无交叉反应
重复性:板内CV≤4.2%,板间CV≤6.2%
注意事项:肝组织样本充分裂解,去除组织残渣;细胞因子易降解,样本低温保存;孵育温度恒定;读数及时,避免数值衰减。
关键注意事项:

本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
实验步骤如下:

试剂盒提前 33min 室温复温,浓缩洗涤液 1:22 稀释,大鼠肝组织上清低温分装保存。
微孔板设置 HGF 梯度标准孔、肝样本孔、空白孔,每孔 100μL 液体。
酶标捕获抗体 100μL / 孔,覆膜 37℃孵育 80min。
洗涤浸泡 37s,洗涤 5 次,彻底拍干微孔水分。
避光显色底物 100μL,37℃显色 16min。
滴加终止液充分混匀微孔。
酶标仪检测 OD450,计算肝细胞生长因子 HGF 浓度。
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