本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附法,固相载体包被大鼠SCF/MGF特异性抗体,加入梯度标准品及待测大鼠样本,样本中的SCF/MGF抗原与固相抗体特异性结合,洗涤去除非特异性成分,加入辣根过氧化物酶标记的对应检测抗体,形成稳定免疫复合物,洗涤后底物显色,显色强度与抗原含量正相关,终止后通过标准曲线完成定量检测。
基本参数:

产品名称:大鼠干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)ELISA试剂盒
英文名称:SCF/MGF ELISA Kit
货号:Y-E1640
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测限0.09ng/mL,可检测大鼠骨髓、血清中微量SCF/MGF
检测范围:0.12ng/mL~15ng/mL,覆盖大鼠造血、干细胞增殖模型浓度区间
反应时间:总时长115分钟,孵育85分钟,显色30分钟
保存条件:2~8℃避光冷藏,细胞因子试剂禁止冷冻
有效期:原装有效期6个月,开封后25天内用完
显色系统:高稳定TMB显色体系,细胞因子检测专用
检测波长:450nm主波长,600nm校正波长
标准曲线绘制:6梯度标准浓度,四参数拟合,R²≥0.994
特异性:特异性识别大鼠SCF/MGF,与其他生长因子无交叉结合
重复性:板内CV≤4.3%,板间CV≤6.3%
注意事项:骨髓样本充分研磨裂解;样本全程低温避光保存;试剂避免污染;孵育温度精准恒定,保证结合效率。
关键注意事项:

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
实验步骤如下:

试剂盒试剂室温平衡 35min,浓缩洗涤液 1:27 稀释,大鼠骨髓上清低温离心去除细胞沉淀。
酶标板各微孔加入 100μL SCF 重组标准蛋白、骨髓上清、空白稀释液。
一步酶结合混合液 200μL / 孔,覆膜 37℃孵育 82min。
洗涤浸泡 45s,洗 5 次,彻底拍干微孔残留洗液。
单一显色底物避光孵育 18min。
终止液中和显色,横向摇晃酶标板混匀。
450nm 检测 OD 值,定量 SCF 干细胞因子浓度。
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