大鼠干细胞因子受体(SCFR)ELISA试剂盒

本试剂盒运用双抗体夹心ELISA检测原理，酶标板微孔包被纯化的大鼠SCFR特异性捕获抗体，加入标准品和待测大鼠细胞组织样本，样本中的SCFR抗原与固相抗体特异性结合，洗板去除游离杂质，加入HRP标记的SCFR检测抗体，形成特异性免疫夹心复合物，经充分洗涤后显色反应，终止后检测吸光度，对照标准曲线精准定量样本中SCFR的含量。
基本参数‌：

产品名称：大鼠干细胞因子受体(SCFR)ELISA试剂盒

英文名称：SCFR ELISA Kit
货号：Y-E1522

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测限0.08ng/mL，可精准检测大鼠干细胞、组织膜表面SCFR含量

检测范围：0.1ng/mL～12ng/mL，适配大鼠干细胞分化、造血模型检测

反应时间：总时长105分钟，孵育75分钟，显色30分钟

保存条件：2～8℃避光冷藏，膜蛋白试剂密封防潮保存

有效期：原装有效期6个月，开封后30天内使用完毕

显色系统：优化TMB显色系统，膜蛋白检测适配性高

检测波长：450nm检测波长，630nm校正波长

标准曲线绘制：6梯度标准品，四参数拟合，R²≥0.995

特异性：特异性结合大鼠SCFR受体蛋白，与其他受体蛋白无交叉反应

重复性：板内CV≤3.8%，板间CV≤5.8%

注意事项：膜蛋白样本需充分裂解提取；避免样本杂质堵孔；洗涤轻柔彻底；显色终止后快速上机读数。
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

试剂盒室温回温 24min，洗涤缓冲液 1:20 稀释，大鼠造血细胞膜裂解上清低温避光。

微孔板设置 SCFR 梯度标准孔、膜样本孔、空白对照孔，每孔 100μL 液体。

酶标特异性抗体 100μL 每孔，密封 37℃孵育 63min。

洗涤浸泡 28s，洗 3 次，吸干微孔水分。

避光显色底物 100μL，37℃显色 12min。

终止液 50μL 混匀微孔液体。

酶标仪测 OD450，计算干细胞因子受体 SCFR 蛋白含量。
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