大鼠羟脯氨酸(Hyp)ELISA试剂盒

本试剂盒依托竞争法酶联免疫吸附原理检测大鼠羟脯氨酸（Hyp）含量，酶标板微孔包被有Hyp特异性固相抗原。检测体系中，样本、标准品中的内源性Hyp与固相抗原竞争结合定量的酶标特异性抗体，恒温孵育后彻底洗板，清除未结合的游离抗原与抗体。加入显色底物后发生酶促显色反应，显色强度与样本中Hyp浓度呈负相关，终止反应后检测吸光度，通过标准曲线拟合计算大鼠样本中羟脯氨酸的含量。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测灵敏度0.2μg/mL，可精准检测大鼠组织、血清中羟脯氨酸含量。

检测范围：0.6μg/mL - 100μg/mL，适配大鼠肝纤维化、肺纤维化、组织损伤修复模型。

反应时间：全流程反应90分钟，检测速度快，适配纤维化模型批量样本检测。

保存条件：2 - 8℃冷藏保存，洗涤液、显色液常规避光存放即可。

有效期：未开封有效期12个月，实验室常规保存稳定。

特异性：特异性结合大鼠羟脯氨酸，与普通脯氨酸、氨基酸类物质无交叉反应。

重复性：板内CV≤6%，板间CV≤8%，数据重复性满足科研要求。

注意事项：组织样本需充分水解处理，保证羟脯氨酸充分释放；实验避免杂质污染反应孔；显色时间统一，保证读数一致性。
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发

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实验操作流程：

1. 试剂盒组分室温放置 26min，配制稀释洗涤液；胶原水解待测样本过滤去除颗粒物。

2. 酶标板分孔设置，标准品孔加入梯度 Hyp 标准品 50μL，样本孔加入处理后待测液 50μL，空白孔不加样。

3. 所有加样孔直接添加酶标记结合液 100μL，严实封板。

4. 37℃避光孵育 55min，实现一步法抗原抗体结合。

5. 倒扣倒掉孔内液体，洗涤液浸泡 25s，洗板 4 次，微孔充分拍干。

6. 加入显色 A、B 液各 50μL，轻微震荡混匀，37℃避光显色 13min。

7. 加入终止液终止反应，450nm 测吸光度，计算羟脯氨酸含量。