人羟脯氨酸糖蛋白(HRGP)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心ELISA检测原理，酶标板微孔包被抗人羟脯氨酸糖蛋白特异性抗体。样本中的HRGP抗原与固相抗体特异性结合，孵育洗涤后加入HRP标记检测抗体，形成稳定的免疫夹心复合物，经底物显色、终止反应后，通过酶标仪读取吸光度值，结合标准曲线即可精准测定样本中羟脯氨酸糖蛋白的含量。
产品参数：

‌灵敏度：最低可测 0.105ng/mL

检测范围：0.33ng/mL～21.12ng/mL

反应时间：室温结合 64min，37℃二抗 55min，显色 18min

保存条件：整套试剂 2～8℃避光防潮，浓缩洗涤液稀释后室温可存 5 天

显色系统：单组份稳定 TMB 显色液

检测波长：450nm+630nm 双波长

标准曲线绘制：最小二乘法线性回归构建标准曲线

注意事项：植物源性样本混入会严重干扰 HRGP 检测，操作环境避免外源蛋白污染
关键注意事项：

本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。

全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。

移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。

孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。

洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。

终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。

终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。

实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。

不同批次试剂盒组分不可混用。

试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。

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实验操作流程：

全部组分室温平衡 35min，稀释浓缩洗涤缓冲液；组装酶标板并标记标准、样本、空白孔。

标准品孔加入倍比稀释 HRGP 标准品 50μL，样本孔加入稀释待测样品 50μL，空白孔不加试剂。

每孔加入一步法酶标记抗体工作液 100μL，密封封板膜。

37℃恒温避光孵育 66min，保证免疫反应完全。

洗板 4 次，每次洗涤液浸泡 36s，甩干后吸干孔底残留液体。

每孔添加显色底物 A、B 各 50μL，避光 37℃显色 16min。

终止液终止反应，酶标仪 450nm 读取 OD 值，对照曲线计算 HRGP 含量。