本试剂盒基于双抗体夹心ELISA核心原理,开展大鼠热休克蛋白60(Hsp-60)的定量检测。酶标板微孔包被纯化的Hsp-60特异性抗体,加入梯度标准品和待测样本后,样本中的Hsp-60抗原与固相抗体特异性结合,经孵育、洗板纯化反应体系,加入酶标记检测抗体形成免疫复合物。底物显色后,吸光度与Hsp-60浓度呈正相关,终止反应后对照标准曲线即可计算样本蛋白含量。
产品参数:
产品名称 | 大鼠热休克蛋白60(Hsp-60)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1269 |
英文名称 | hSP-60 ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测值0.1ng/mL,超高灵敏度检测线粒体热休克蛋白Hsp-60。
检测范围:0.3ng/mL - 130ng/mL,覆盖大鼠线粒体损伤、氧化应激、炎症模型。
反应时间:全流程反应120分钟,充分孵育保障微量蛋白结合。
保存条件:2 - 8℃冷藏避光保存,抗体组分单独密封,严禁冷冻。
有效期:原装密封有效期12个月,稳定性优异。
特异性:特异性识别大鼠Hsp-60,与胞质热休克蛋白无交叉反应,靶向性强。
重复性:板内CV≤5%,板间CV≤7%,检测误差极低。
注意事项:线粒体样本提取后立即检测,防止蛋白降解;孵育温度精准恒定;显色避光操作,避免颜色偏差。
储存与有效期:
未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
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实验操作流程:
1. 试剂盒试剂室温复温 36min,稀释洗涤浓缩液;线粒体提取上清样本低温离心去除沉淀。
2. 标记酶标板孔类型,标准品孔加入梯度 Hsp-60 标准品 50μL,样本孔加入待测上清 50μL,空白孔不加样。
3. 向所有加样孔加入酶偶联标记工作液 100μL,封板密封避光。
4. 37℃避光孵育 80min,长时间孵育保证结合充分。
5. 倒扣弃液,洗涤液浸泡微孔 42s,洗板 6 次,彻底拍干微孔水分。
6. 依次添加显色 A、B 底物各 50μL,轻晃板面混匀,37℃避光显色 23min。
7. 滴加终止液 50μL 终止反应,酶标仪 450nm 测 OD 值,定量 Hsp-60 浓度。
关键字: 大鼠热休克蛋白60;Hsp-60;ELISA试剂盒;
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