本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理,预先将纯化的大鼠β-CG特异性抗体包被于酶标板微孔内,形成固相抗体。检测时,样本、标准品中的大鼠β-CG会与固相抗体特异性结合,洗去未结合物质后,加入酶标记的检测抗体,形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”的免疫复合物。经底物显色、终止液终止反应后,通过酶标仪测定各孔吸光度值,吸光度数值与样本中大鼠β-CG的含量呈正相关,结合标准曲线即可精准计算出样本中目标指标的浓度。
产品参数:
产品名称 | 大鼠绒毛膜促性腺激素β(β-CG)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1371 |
英文名称 | β-CG ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测浓度可达0.15mIU/mL,无交叉反应干扰,检测下限精准。
检测范围:0.3mIU/mL - 12mIU/mL,适配大鼠血清、血浆及组织匀浆样本检测。
反应时间:整体实验操作时长90分钟,温育分两步,分别为37℃30分钟、37℃30分钟,显色15分钟。
保存条件:试剂盒未开封整体2-8℃冷藏保存,浓缩洗涤液可室温避光保存,严禁冷冻。
有效期:未开封原装试剂盒有效期6个月,开封后组分1个月内用完。
特异性:仅特异性识别大鼠β-CG,与大鼠α-CG、人CG、小鼠CG无交叉反应。
重复性:板内变异系数CV≤8%,板间变异系数CV≤10%,实验重复性良好。
注意事项:样本需避免反复冻融,溶血、脂血样本会干扰检测结果;温育过程需严格避光,保证温度恒定。
试剂盒组成:
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
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实验操作流程:
试剂盒室温平衡 30min,配制洗涤液、β-CG 标准品梯度稀释液,酶标板预留空白孔、标准品孔、待测样本孔并做好标记。
标准品孔依次加入不同浓度 β-CG 标准液 50μL,样本孔加入稀释后待测大鼠血清 / 组织上清 50μL,空白孔加等量样本稀释液,每孔立即加入 100μL 酶结合工作液,封板膜封板。
恒温 37℃避光孵育 60min,充分让抗原与酶标抗体特异性结合。
揭去封板膜,弃净孔内液体,每孔加满洗涤缓冲液静置 30s 后甩干,重复洗板 5 次,拍干酶标板残留液体。
每孔依次加入显色液 A 液 50μL、显色液 B 液 50μL,轻柔震荡混匀,37℃避光显色 15min。
全部孔位加入终止液 50μL 终止酶促显色反应,轻晃酶标板混匀。
15min 内使用酶标仪在 450nm 波长测定各孔 OD 吸光度值,根据标准品浓度与 OD 值绘制标准曲线,计算样本中 β-CG 含量。
关键字: 大鼠绒毛膜促性腺激素β;β-CG;ELISA试剂盒;
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