本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理,酶标板微孔包被大鼠f-βCG特异性捕获抗体,加入标准品及大鼠待测样本,样本中的游离β绒毛膜促性腺激素与固相抗体特异性结合,洗板去除游离杂质后,加入酶标记f-βCG检测抗体形成夹心免疫复合物,底物显色后,体系吸光度值与样本中f-βCG浓度呈线性正相关,结合标准曲线可精准测定其含量。
基本参数:

产品名称:大鼠游离β绒毛膜促性腺激素(f-βCG)ELISA试剂盒
英文名称:f-βCG ELISA Kit
货号:Y-E1588
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测浓度0.2mIU/mL
检测范围:0.5mIU/mL - 80mIU/mL
反应时间:全程160分钟(样本孵育100min,酶标孵育30min,显色30min)
保存条件:2-8℃避光冷藏,标准品独立分装保存
有效期:未开封储存有效期10个月
特异性:特异性检测大鼠游离β-HCG,不与完整HCG、LH、FSH发生交叉反应
重复性:板内变异系数CV≤5%,板间变异系数CV≤7%
注意事项:样本避免高脂、高胆红素干扰;标准品现配现用,不可重复使用;实验温度严格控制37℃
关键注意事项:

本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
实验步骤如下:

试剂盒室温平衡 25min,稀释洗涤工作液,逐级稀释 f-βCG 标准品,酶标板划分检测孔并编号。
标准孔加入梯度游离 β 绒毛膜促性腺激素标准品 50μL,待测孔加入 50μL 大鼠血清样本,空白孔不加试剂。
检测孔加入一步法酶标记抗体工作液 100μL,封板膜密封,37℃孵育 48min。
弃去孔内液体,洗涤液浸泡 30s 甩干,洗板 4 次,吸水纸拍干微孔。
每孔加显色底物 A、B 各 50μL,避光 37℃显色 14min。
加入终止液 50μL 终止显色,混匀体系液体。
酶标仪 450nm 测 OD 值,标准曲线计算 f-βCG 浓度。
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