本试剂盒依托双抗体夹心ELISA技术原理,将大鼠VEGF-B特异性捕获抗体固定于微孔板表面,加入标准品与待测大鼠样本后,样本中的VEGF-B抗原与固相抗体发生特异性结合,孵育洗涤后加入酶标记VEGF-B检测抗体,形成稳定的免疫复合物,随后进行底物显色、终止反应操作,通过酶标仪读取各孔吸光度,吸光度大小与样本中VEGF-B浓度呈正相关,拟合标准曲线即可完成定量检测。
基本参数:

产品名称:大鼠血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)ELISA试剂盒
英文名称:VEGF-B ELISA Kit
货号:Y-E1539
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测灵敏度≤3pg/mL,适配大鼠低浓度VEGF-B样本精准检测
检测范围:6pg/mL - 900pg/mL,覆盖大鼠心肌、血管组织VEGF-B表达区间
反应时间:全流程反应耗时95分钟,分步温育,抗原抗体结合充分
保存条件:试剂2-8℃冷藏避光保存,严禁冷冻,标准品需密封存放
有效期:未开封试剂盒有效期6个月
特异性:专一性识别大鼠VEGF-B,与VEGF-A、VEGF-C、VEGF-D无交叉反应
重复性:板内变异系数≤7%,板间变异系数≤8%
注意事项:组织样本匀浆需充分离心,去除残渣;不同批次试剂不可混用,保证实验一致性。
关键注意事项:

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
实验步骤如下:

试剂盒室温放置 25min,截取对应数量酶标条,区分空白、标准、待测三组孔位。
标准品稀释成 5 个浓度梯度,标准孔加 55μL 标品,样本孔上样 55μL 大鼠组织上清,空白孔补稀释液。
每孔加入酶偶联试剂 110μL,覆膜封闭微孔板,37℃孵育 56min。
洗板 5 次,每次浸泡 31s,甩干废液后吸干板底水分。
显色混合液 100μL 加入各孔,避光 37℃显色 18min。
加入 55μL 终止液终止显色,横向摇晃酶标板混匀。
酶标仪 450nm 读数,换算样本 VEGF-B 含量。
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