本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测原理，微孔板固相包被大鼠VEGF特异性捕获抗体，加入梯度标准品和待测大鼠血清、组织样本后，样本中的VEGF抗原与固相抗体特异性结合，洗板去除未结合杂质，加入辣根过氧化物酶标记的VEGF检测抗体，形成特异性免疫夹心复合物，经底物显色、终止反应后，酶标仪检测吸光度，吸光度数值与样本中VEGF含量成正比，结合标准曲线可精准检测大鼠血管内皮细胞生长因子的含量。
基本参数：
产品名称：大鼠血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒
英文名称：VEGF ELISA Kit
货号：Y-E1637
规格：48T/96T
灵敏度：最低检测灵敏度≤2pg/mL，可精准检测大鼠血清、组织中微量VEGF含量
检测范围：5pg/mL - 1000pg/mL，覆盖大鼠血管生成、肿瘤、缺血模型浓度区间
反应时间：全流程实验耗时90分钟，反应体系成熟，检测稳定性高
保存条件：试剂盒2-8℃避光冷藏，酶标板剩余孔位密封保存，防止干燥失效
有效期：未开封原装试剂盒有效期6个月
特异性：特异性结合大鼠VEGF，与其他生长因子无明显交叉反应
重复性：板内、板间变异系数均＜8%，重复性良好
注意事项：样本采集后低温保存，避免蛋白降解；实验全程避光操作，显色液对光照敏感。
试剂盒组成：
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点
辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：
试剂室温平衡 34min，拆分酶标板，设置对照孔与检测孔并做好标记。
梯度稀释标准品，标准孔加 50μL 标品，细胞上清孔加入 50μL 大鼠待测样品，空白孔加稀释液。
每孔加入酶标记二抗 100μL，封板避光 37℃孵育 70min。
手动洗板 6 次，洗涤液浸泡 33s / 次，彻底去除未结合反应物。
每孔加入显色底物 100μL，避光显色 16min。
滴加 50μL 终止液终止反应，混匀微孔内液体。
450nm 波长检测吸光度，拟合曲线计算 VEGF 浓度。
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