大鼠上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测原理，酶标板微孔内预包被大鼠ENA-78/CXCL5特异性抗体。实验中，样本与标准品中的目标趋化因子与固相抗体特异性结合，洗孔去除游离物质后，加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体，形成完整免疫夹心复合物。底物催化显色后终止反应，测定吸光度，数值与样本中ENA-78/CXCL5浓度成正比，依据标准曲线可精准定量样本中目标因子含量。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度0.22pg/mL，超高灵敏度适配炎症微量因子检测。

检测范围：0.5pg/mL - 150pg/mL，适配大鼠血清、炎症组织、细胞上清样本。

反应时间：总时长115分钟，样本温育50分钟、二抗温育40分钟、显色25分钟。

保存条件：所有组分2-8℃避光保存，严禁冷冻，稀释后洗涤液4℃可存5天。

有效期：原装有效期12个月，多次取用后剩余试剂1个月内用完。

特异性：特异性结合大鼠CXCL5/ENA-78，与其他趋化因子家族蛋白无交叉反应。

重复性：板内CV≤8%，板间CV≤10%，炎症因子检测误差可控。

注意事项：炎症样本需及时检测，避免因子降解；实验耗材需无热源、无内毒素污染。
关键注意事项：

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异

所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）

避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用

洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果

显色过程需避光，避免阳光直射影响结果

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实验操作流程：

试剂盒常温平衡 27min，按配比稀释浓缩洗涤液，逐级稀释 ENA-78 标准品，设定酶标板空白对照、标准梯度、待测样本区域。

标准孔加入对应浓度 ENA-78 标准液 50μL，样本孔加入大鼠细胞上清样本 50μL，空白孔添加稀释液 50μL，全部孔加入酶结合工作液 100μL，密封封板。

37℃避光孵育 48min，完成特异性免疫结合反应。

去除封板，弃液后洗涤液注满每孔浸泡 38s，甩干洗板 4 次，去除非特异性吸附杂质。

每孔加入显色 A 液、B 液各 50μL，混匀后 37℃避光显色 13min。

加入终止液 50μL 终止显色反应，水平晃动酶标板混匀。

酶标仪 450nm 测定吸光度，拟合标准曲线计算样本 ENA-78 含量。