本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附检测原理,微孔板固相包被大鼠BK抗原,检测时向孔内加入待测样本、标准品及特异性抗体,样本中的血管舒缓激肽与固相包被抗原竞争结合有限的抗体结合位点,孵育平衡后洗涤去除未结合物质,加入酶标记二抗孵育反应,再次洗涤后通过底物显色、终止反应,酶标仪测定的吸光度值与样本中BK含量呈负相关,依据标准曲线可准确计算样本中血管舒缓激肽的浓度。
基本参数:

产品名称:大鼠血管舒缓激肽(BK)ELISA试剂盒
英文名称:BK ELISA Kit
货号:Y-E1595
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测灵敏度≤6pg/mL,精准检测大鼠血浆、组织中BK微量含量
检测范围:12pg/mL - 600pg/mL,覆盖大鼠炎症、血管舒张相关模型浓度区间
反应时间:全流程实验耗时95分钟,反应稳定,数据偏差小
保存条件:试剂2-8℃避光冷藏,多肽类标准品需分装冻存,避免降解
有效期:原装未开封试剂盒有效期6个月
特异性:专一性结合大鼠血管舒缓激肽,与其他多肽激素无交叉反应
重复性:板内变异系数≤7%,板间变异系数≤8%
注意事项:BK多肽易降解,样本采集后需快速低温处理、及时检测。
试剂盒组成:

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下:

试剂室温回温 34min,拆分酶标板,规划孔位并区分空白、标品、样本组。
梯度稀释标准品,标准孔加 50μL 标品,血浆样本孔加入 50μL 大鼠待测血浆,空白孔加稀释液。
每孔加入酶标记二抗 100μL,封板避光 37℃孵育 68min。
洗板 6 次,单次浸泡 38s,彻底清洗微孔去除杂质。
显色双组分各 50μL 添加,避光显色 17min。
50μL 终止液终止酶促反应,摇晃混匀微孔板。
450nm 测吸光度,依据标准曲线得到 BK 含量。
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