本试剂盒依托双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，将大鼠ANG-2特异性捕获抗体固定于微孔板表面，作为固相检测载体，加入标准品和大鼠待测样本后，样本中的ANG-2抗原与固相抗体特异性结合，洗板去除未结合杂质，加入酶标记的ANG-2检测抗体孵育结合，形成稳定免疫复合物，通过底物显色、终止反应后检测吸光度，OD值与ANG-2浓度正相关，拟合标准曲线即可精准定量样本中血管生成素2的含量。
基本参数：
产品名称：大鼠血管生成素2(ANG-2)ELISA试剂盒
英文名称：ANG-2 ELISA Kit
货号：Y-E1573
规格：48T/96T
灵敏度：最低检测灵敏度≤2pg/mL，适配大鼠血管重塑、炎症模型低浓度ANG-2检测
检测范围：4pg/mL - 800pg/mL，覆盖大鼠病理性血管新生浓度变化区间
反应时间：全流程实验耗时95分钟，温育充分，显色稳定
保存条件：试剂2-8℃避光密封冷藏，开封后尽快使用
有效期：原装未开封试剂盒有效期6个月
特异性：专一性识别大鼠ANG-2，与其他血管生成素亚型无交叉干扰
重复性：板内变异系数≤7%，板间变异系数≤8%
注意事项：实验试剂使用前需充分混匀，保证体系均一，减少实验误差。
通用注意事项：
样本要求
血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。
温度控制
孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。
避光操作
TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。
洗板规范
洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。
污染防控
实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。
安全防护
终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。
失效判定
试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。
稀释校正
样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。
空白对照
空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。
储存禁忌
试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：
所有试剂室温静置 31min，取出酶标板拆分使用，编号标记全部实验孔。
梯度稀释标准品构建标准曲线，标准孔加 50μL 标品，细胞上清样本孔上样 50μL 待测液，空白孔加稀释缓冲液。
每孔加入酶工作液 100μL，密封封膜，37℃恒温孵育 64min。
洗板 5 次，单次浸泡 32s，倒置微孔板沥干废液。
显色双液各 50μL 添加，避光显色 16min。
50μL 终止液加入终止反应，轻震酶标板混匀。
450nm 读取 OD 值，换算样本 ANG-2 含量。
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