本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附技术原理，微孔板预先包被纯化的大鼠HO-1特异性抗体，作为固相捕获载体，加入标准品和待测大鼠组织、血清样本后，样本中的HO-1抗原与固相抗体特异性结合，洗涤去除未结合杂质，加入酶标记HO-1检测抗体，形成完整免疫复合物，经底物显色、终止反应后检测吸光度，OD值与样本中HO-1含量正相关，通过标准曲线可精准测定血红素氧合酶1的浓度。
基本参数：
产品名称：大鼠血红素氧合酶1(HO-1)ELISA试剂盒
英文名称：HO-1 ELISA Kit
货号：Y-E1360
规格：48T/96T
灵敏度：最低检测灵敏度≤2pg/mL，精准检测大鼠氧化应激模型中HO-1微量表达
检测范围：4pg/mL - 900pg/mL，覆盖大鼠抗氧化、损伤修复浓度区间
反应时间：全流程实验耗时90分钟，操作简洁，重复性高
保存条件：试剂盒2-8℃避光冷藏保存，密封防潮
有效期：未开封试剂盒有效期6个月
特异性：特异性识别大鼠HO-1，与HO-2无交叉反应
重复性：板内、板间变异系数均＜8%
注意事项：氧化应激样本需低温避光处理，防止HO-1蛋白氧化降解。
实验前准备工作：
1. 试剂平衡与稀释
试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。
浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。
标准品复溶 / 梯度稀释：
冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；
按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。
待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。
2. 耗材与设备准备
设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。
耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。
取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。
3. 孔位规划标记
酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：
试剂盒室温回温 28min，按需取用酶标板条，划分空白、标准、待测孔位。
标准品倍比稀释，标准孔加 55μL 标品，细胞裂解上清孔上样 55μL 待测样本，空白孔补齐稀释液。
每孔加入酶标记抗体液 110μL，封板 37℃孵育 54min。
洗板 6 次，洗涤液浸泡 35s / 次，拍干微孔底部残留液体。
显色混合液 100μL 加入各孔，避光室温显色 16min。
60μL 终止液终止显色，轻微摇晃酶标板。
450nm 测 OD 值，计算样本 HO-1 浓度。
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