本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理,微孔板预先包被纯化的大鼠ANG-1特异性捕获抗体,加入待测样本和梯度标准品后,样本中的ANG-1抗原与固相抗体特异性结合,孵育充分反应后洗涤去除游离物质,加入酶标记ANG-1检测抗体,形成固相抗体-抗原-酶标抗体复合物,经酶促底物显色、终止反应后检测吸光度,吸光度与样本中ANG-1含量成正比,对照标准曲线实现定量检测。
基本参数:

产品名称:大鼠血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒
英文名称:ANG-1 ELISA Kit
货号:Y-E1574
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测灵敏度≤2.5pg/mL,精准检测大鼠血管修复相关ANG-1含量
检测范围:5pg/mL - 750pg/mL,覆盖大鼠血管稳态、损伤修复模型浓度区间
反应时间:全流程反应耗时90分钟,操作简便,数据稳定
保存条件:试剂盒2-8℃避光冷藏,严禁冷冻,标准品密封保存
有效期:未开封试剂盒有效期6个月
特异性:特异性结合大鼠ANG-1,与ANG-2、ANG-4无交叉反应
重复性:板内、板间变异系数均<8%
注意事项:样本避免脂血、溶血,否则会干扰特异性结合反应,降低检测精度。
关键注意事项:

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
实验步骤如下:

试剂盒室温平衡 26min,按需拆分酶标板条,区分空白、标准、样品三类微孔。
冻干标准品溶解后倍比稀释,标准孔加 55μL 标品,组织匀浆样本孔加入 55μL 待测上清,空白孔补齐稀释液。
每孔加入酶结合检测液 110μL,封板 37℃孵育 59min。
洗板 4 次,洗涤液浸泡 27s / 次,甩干废液并拍干微孔。
100μL 显色工作液加入各孔,避光 37℃显色 19min。
60μL 终止液终止酶促反应,摇晃酶标板混匀。
450nm 检测吸光度,绘制标准曲线定量 ANG-1。
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