本试剂盒基于竞争法ELISA检测原理,酶标板微孔内预包被大鼠血栓素B2(TXB2)抗原,样本中的TXB2与包被抗原竞争结合特异性抗体,再结合酶标记抗体形成免疫结合体系,洗涤除去未结合的抗体及杂质,加入底物液显色,样本中TXB2含量越高,竞争结合的抗体越少,显色越浅,通过检测吸光度并对照标准曲线,可定量测定大鼠样本中TXB2的浓度。
基本参数:

产品名称:大鼠血栓素B2(TXB2)ELISA试剂盒
英文名称:TXB2 ELISA Kit
货号:Y-E1425
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测浓度1.0pg/mL
检测范围:2.5pg/mL - 500pg/mL
反应时间:总反应时长120分钟
保存条件:2-8℃避光保存,抗体浓缩液-20℃密封保存
有效期:常温避光未开封6个月,低温分装试剂12个月
特异性:精准识别大鼠TXB2,与前列环素、血栓素同源类似物无交叉反应
重复性:板内变异系数≤4.5%,板间变异系数≤6.5%
注意事项:样本采集后需快速低温离心,避免TXB2降解,实验避光操作
通用注意事项:

样本要求
血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸;组织匀浆充分离心去除沉淀;样本分装冻存,反复冻融≥3 次会导致抗原降解,检测值偏低。
温度控制
孵育温度严格 37℃,温箱温度波动、室温过低会降低结合效率,背景升高、重复性变差。
避光操作
TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化,显色全程避光,试剂避光存放。
洗板规范
洗涤不充分会造成高背景、假阳性;拍干时使用干净吸水纸,禁止交叉污染微孔。
污染防控
实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶;枪头一次性更换,标准品与样本避免交叉加样;底物液变色、出现沉淀不可使用。
安全防护
终止液含稀硫酸,具有腐蚀性,避免接触皮肤、黏膜;实验废液集中收集中和后处理,不可直接倾倒。
失效判定
试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异,均判定失效,禁止继续实验。
稀释校正
样本 OD 值高于最高标准孔时,必须稀释重测,最终结果乘以稀释倍数;低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。
空白对照
空白孔吸光度应极低,若空白孔 OD>0.1,说明洗涤不充分或试剂污染,实验作废重做。
储存禁忌
试剂盒不可冷冻结冰,冷冻会造成酶标抗体蛋白变性,直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下:

试剂盒室温放置 30min,稀释浓缩洗涤液,配制 TXB2 系列标准浓度溶液,待测大鼠血浆样本按要求稀释预处理。
排布酶标板孔位,空白孔加稀释液,标准孔加梯度 TXB2 标准品,样本孔加待测样本,全部孔位加入一步法酶标记抗体工作液,封板密封。
37℃避光孵育 65min,全程避免试剂挥发与交叉污染。
弃去孔中反应液,洗涤液加满每孔浸泡 35s,倒掉洗液,反复洗板 5 次,最后一次强力拍干微孔水分。
每孔加入等量显色底物 A、B 液,轻微振荡混匀,37℃避光显色 18min。
加入终止液终止催化反应,混匀板面所有微孔液体。
波长 450nm 酶标仪测定吸光值,拟合标准曲线计算样本 TXB2 含量。
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关键字: 大鼠血栓素B2;TXB2;ELISA试剂盒;
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