本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理,以预包被于酶标板的大鼠血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)特异性抗体为固相载体,捕获待测样本中的TSP-1抗原,加入酶标记特异性抗体形成固相夹心免疫复合物,洗涤去除游离杂质后启动酶促显色反应,终止后测定吸光度,吸光度值与样本中TSP-1含量成正比,借助标准曲线完成定量检测。
基本参数:

产品名称:大鼠血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)ELISA试剂盒
英文名称:TSP-1 ELISA Kit
货号:Y-E1213
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测浓度0.06ng/mL
检测范围:0.15ng/mL - 30ng/mL
反应时间:总反应时长120分钟
保存条件:2-8℃避光保存,高浓度抗体试剂-20℃保存
有效期:常规组件6个月,低温试剂12个月
特异性:特异性结合大鼠TSP-1,与TSP家族其他亚型无交叉反应
重复性:板内变异系数≤4.8%,板间变异系数≤6.8%
注意事项:实验耗材需洁净无蛋白污染,孵育温度严格控制在37℃
试剂盒组成:

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下:

试剂盒室温放置 32min,稀释洗涤缓冲液,配制 TSP-1 梯度标准液,待测血清样本按比例稀释备用。
酶标板分区标记孔位,空白孔加稀释液,标准孔加梯度标品,样本孔加待测样本,每孔加入一步法酶抗体液,封板密封。
37℃避光孵育 62min,避免板面磕碰漏液。
弃除孔内液体,洗涤液浸泡微孔 32s,倾倒废液,洗板 5 次,每次拍干微孔。
加入显色底物 AB 混合液,震荡混匀,37℃避光显色 17min。
加入终止液终止酶促反应,摇匀酶标板。
酶标仪 450nm 检测 OD 值,换算得到样本 TSP-1 浓度。
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