大鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA试剂盒

本试剂盒依托双抗体夹心ELISA技术原理，酶标板预先固定大鼠一氧化氮合成酶(NOS)特异性抗体，待测大鼠样本中的NOS抗原与固相抗体特异性结合，加入酶标记特异性抗体形成免疫夹心复合物，经洗涤、显色、终止反应后，酶标仪检测吸光度，依据吸光度数值与标准曲线，精准定量样本中NOS的浓度。
基本参数‌：

产品名称：大鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA试剂盒

英文名称：NOS ELISA Kit
货号：Y-E1340

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测浓度0.1U/mL

检测范围：0.4U/mL - 22U/mL

反应时间：总反应时长100分钟

保存条件：2-8℃冷藏保存，酶类试剂严禁冷冻

有效期：未开封完好保存6个月

特异性：广谱识别大鼠总NOS，与其他氧化酶无交叉反应

重复性：板内变异系数≤5.2%，板间变异系数≤7.2%

注意事项：避免样本反复冻融，酶蛋白易变性失活，影响酶活性检测
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

试剂盒室温静置 27min，配制洗涤工作液，逐级稀释 NOS 标准品，待测组织匀浆上清样本过滤除杂。

酶标板分孔标记，空白孔加稀释缓冲液，标准孔加梯度标品，样本孔加待测液，所有孔加入酶标记液，封板密封。

37℃避光孵育 58min，控制孵育时长精准无偏差。

弃液洗板，洗涤液浸泡微孔 28s，甩干，循环洗板 4 次，吸水纸拍干微孔。

添加显色底物 AB 液，轻微震荡混匀，37℃避光显色 13min。

滴加终止液终止催化显色，混匀板面液体。

450nm 读取 OD 值，计算样本 NOS 表达量。
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