本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法原理，酶标板固相包被大鼠胰岛素样生长因子2(IGF-2)特异性抗体，加入大鼠待测样本后，样本中的IGF-2抗原与包被抗体特异性结合，结合酶标记二抗形成夹心免疫复合物，经洗涤、显色、终止反应后，检测吸光度并对照标准曲线，精准定量样本中IGF-2含量。
基本参数：
产品名称：大鼠胰岛素样生长因子2(IGF-2)ELISA试剂盒
英文名称：IGF-2 ELISA Kit
货号：Y-E1655
规格：48T/96T
灵敏度：最低检测浓度0.05ng/mL
检测范围：0.15ng/mL - 31ng/mL
反应时间：总反应时长100分钟
保存条件：2-8℃低温避光保存，试剂密封防潮
有效期：未开封完好保存6个月
特异性：专一识别大鼠IGF-2，与IGF-1无交叉反应
重复性：板内变异系数≤4.4%，板间变异系数≤6.4%
注意事项：孵育温度恒定37℃，温度波动会影响抗原抗体结合效率
通用注意事项：
样本要求
血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。
温度控制
孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。
避光操作
TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。
洗板规范
洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。
污染防控
实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。
安全防护
终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。
失效判定
试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。
稀释校正
样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。
空白对照
空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。
储存禁忌
试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：
试剂盒室温静置 28min，稀释洗涤缓冲液，逐级稀释 IGF-2 标准品，大鼠血清样本离心去除杂质。
酶标板划分孔位，空白孔加稀释液，标准孔加梯度标品，样本孔加待测样本，每孔加入酶偶联试剂，封板密封。
37℃避光孵育 60min，温度稳定无波动。
弃除孔内液体，洗涤液浸泡微孔 28s，甩干，洗板 4 次，拍干微孔内水分。
添加显色 A、B 液，轻微震荡混匀，37℃避光显色 14min。
滴加终止液终止显色反应，混匀微孔溶液。
450nm 测吸光度，换算样本 IGF-2 浓度。
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