本试剂盒依托双抗体夹心ELISA技术原理，酶标板预先包被大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)特异性抗体，待测样本中的IGFBP-1抗原与固相抗体特异性结合，后续加入酶标记特异性抗体形成稳定免疫复合物，洗涤去除杂质后进行显色反应，显色强度与IGFBP-1浓度成正比，结合标准曲线实现定量检测。
基本参数：
产品名称：大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)ELISA试剂盒
英文名称：IGFBP-1 ELISA Kit
货号：Y-E1548
规格：48T/96T
灵敏度：最低检测浓度0.08ng/mL
检测范围：0.22ng/mL - 40ng/mL
反应时间：总反应时长115分钟
保存条件：2-8℃避光保存，标准品分装低温存放
有效期：试剂盒整机6个月，分装标准品3个月
特异性：特异性结合大鼠IGFBP-1，与其他IGF结合蛋白无交叉反应
重复性：板内变异系数≤5.0%，板间变异系数≤7.0%
注意事项：样本需去除杂质蛋白，避免结合蛋白干扰检测结果
实验前准备工作：
1. 试剂平衡与稀释
试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。
浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。
标准品复溶 / 梯度稀释：
冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；
按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。
待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。
2. 耗材与设备准备
设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。
耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。
取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。
3. 孔位规划标记
酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：
试剂盒室温回温 32min，稀释浓缩洗涤液，配制 IGFBP-1 梯度标准溶液，待测血浆样本预处理澄清。
标记酶标板各孔，空白、标准、样本孔依次加注对应液体，每孔加入一步法酶结合试剂，覆膜封板。
37℃避光孵育 64min，平放酶标板避免漏液污染。
揭膜倒液，洗涤液浸泡每孔 32s，甩干废液，洗板 5 次，彻底吸干微孔残留洗液。
加入显色底物 AB 液，震荡混匀，37℃避光显色 17min。
加入终止液终止酶促显色，轻摇酶标板混匀。
450nm 波长读取 OD 值，标准曲线法计算 IGFBP-1 含量。
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