本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法原理,将纯化的大鼠ALDH特异性抗体固定于酶标板微孔作为固相捕获抗体,加入梯度标准品和大鼠待测样本,样本中的乙醛脱氢酶与固相抗体特异性结合,洗涤纯化后加入酶标记ALDH检测抗体,孵育形成特异性免疫复合物,底物显色后,显色强度随样本中ALDH含量升高而增强,通过酶标仪检测吸光度,结合标准曲线可精准测定样本中ALDH的浓度。
基本参数:

产品名称:大鼠乙醛脱氢酶(ALDH)ELISA试剂盒
英文名称:ALDH ELISA Kit
货号:Y-E1085
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测浓度0.18U/L
检测范围:0.4U/L - 50U/L
反应时间:全程100分钟(样本孵育40min,酶标孵育30min,显色30min)
保存条件:2-8℃避光冷藏,开封试剂1个月内用完
有效期:未开封储存有效期12个月
特异性:精准识别大鼠乙醛脱氢酶各亚型,与乙醇脱氢酶无交叉反应
重复性:板内变异系数CV≤5%,板间变异系数CV≤7%
注意事项:样本采集后低温保存,防止酶蛋白变性;孵育温度恒定37℃,禁止高低温交替;洗涤液需完全覆盖微孔,保证洗涤效果
关键注意事项:

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
实验步骤如下:

试剂盒室温放置 25min,配比洗涤工作液,梯度稀释 ALDH 标准品,酶标板编号区分空白、标准、待测样本。
标准品孔加入梯度 ALDH 标准品 50μL,样本孔加入 50μL 大鼠细胞裂解上清液,空白孔无添加。
非空白孔加入一步法酶标记抗体工作液 100μL,密封封板,37℃孵育 48min。
倒掉孔内液体,洗涤液浸泡每孔 35s 后甩干,洗板 4 次,拍干微孔残留液体。
每孔加显色 A、B 液各 50μL,避光 37℃显色 13min。
加入终止液 50μL 终止反应,震荡酶标板混匀。
450nm 波长检测吸光度,依据标准曲线计算乙醛脱氢酶 ALDH 浓度。
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关键字: 大鼠乙醛脱氢酶;ALDH;ELISA试剂盒;
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