大鼠糖皮质激素受体α(GR-α)ELISA试剂盒

本试剂盒依托双抗体夹心ELISA原理检测大鼠组织及细胞样本中GR-α含量。酶标板固相载体包被纯化的大鼠GR-α特异性抗体，温育过程中捕获样本中的GR-α抗原，洗板去除非特异性结合成分后，加入HRP标记的GR-α特异性检测抗体，形成稳定免疫复合物，经底物显色、终止反应后检测吸光度，依据标准曲线可精准定量大鼠GR-α的表达水平。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测限0.1ng/mL，精准检测大鼠细胞、组织中GR-α受体蛋白含量。

检测范围：0.2ng/mL - 10ng/mL，适配大鼠内分泌、应激模型样本检测。

反应时间：全程100分钟，恒温孵育70分钟，酶标反应20分钟，显色10分钟。

保存条件：受体抗体试剂2-8℃避光冷藏，严禁冻融，标准品单独密封保存。

有效期：原装有效期7个月，开封后20天内使用完毕。

特异性：专一识别大鼠GR-α亚型，与GR-β亚型无交叉反应，亚型区分度高。

重复性：板内CV≤5.2%，板间CV≤6.8%，受体蛋白检测数据精准。

注意事项：样本需避免激素污染，实验全程低温操作，防止受体蛋白降解。
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。

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实验操作流程：

试剂盒室温静置 28min，稀释洗涤液，逐级稀释 GR-α 标准品，拆分酶标板条，未用板条密封避光低温储存。

标记酶标板各组孔位，标准品孔加入梯度标准品 50μL，待测孔加入组织 / 血清待测样本 50μL，空白孔不加试剂。

非空白孔添加酶偶联工作液 100μL，封板密封，37℃孵育 66min。

倾倒废液，洗涤液浸泡每孔 30s 后拍干，重复洗板 5 次。

加入显色底物 A、B 各 50μL，混匀避光，37℃显色 16min。

滴加终止液 50μL 混匀终止反应。

酶标仪 450nm 测定 OD 值，计算样本 GR-α 浓度。