本试剂盒运用双抗体夹心ELISA法检测大鼠样本中GSK的蛋白含量。酶标板预先包被纯化的大鼠GSK特异性抗体,作为固相捕获载体,加入待测样本与标准品后,GSK抗原与固相抗体特异性免疫结合,洗板去除游离组分,再加入HRP标记的GSK检测抗体形成夹心复合物,底物酶促显色后,吸光度与GSK含量正相关,通过标准曲线计算可精准检测大鼠GSK水平。
产品参数:
产品名称 | 大鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1184 |
英文名称 | GSK ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测限0.22U/L,精准检测大鼠肝脏、肌肉组织中GSK酶活性。
检测范围:0.45U/L - 19U/L,覆盖大鼠糖代谢紊乱、胰岛素抵抗模型检测区间。
反应时间:全程100分钟,恒温酶促反应70分钟,显色30分钟。
保存条件:酶试剂2-8℃冷藏避光,禁止高温,防止酶活性丧失。
有效期:原装有效期6个月,开封后25天内用完。
特异性:特异性结合大鼠GSK靶点,与其他糖原代谢激酶无交叉反应。
重复性:板内CV≤6.8%,板间CV≤8.2%,糖代谢酶检测数据稳定。
注意事项:组织样本需快速低温裂解,避免酶活性降解,孵育温度严格恒定。
关键注意事项:
实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
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实验操作流程:
试剂盒室温静置 30min,稀释浓缩洗涤液,逐级稀释 GSK 标准品制备浓度梯度,拆分酶标板条,未使用板条密封 2~8℃保存。
标记孔位组别,标准品孔加入梯度标准品 50μL,待测样本孔加入组织裂解待测液 50μL,空白孔不加任何液体。
检测孔加入酶标记工作液 100μL,封板密封,37℃恒温孵育 60min。
甩净孔内废液,洗涤液浸泡 35s 拍干,重复洗板 5 次。
加入显色底物 A、B 各 50μL,混匀避光,37℃显色 17min。
加入终止液 50μL 混匀终止反应体系。
酶标仪 450nm 读取 OD 值,计算样本 GSK 含量。
关键字: 大鼠糖原合成酶激酶;GSK;ELISA试剂盒;
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