本试剂盒依托双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理开展检测,酶标板微孔预先包被大鼠ACS特异性单克隆抗体。检测过程中,样本及标准品中的大鼠ACS抗原与固相抗体特异性结合,洗涤去除未结合成分后,加入HRP标记的ACS检测抗体,形成稳定的夹心免疫复合物。随后加入TMB底物进行酶促显色反应,显色程度与样本中ACS含量成正比,终止反应后检测微孔吸光度值,通过标准曲线即可定量分析大鼠样本中脂酰辅酶A合成酶的浓度。
产品参数:
产品名称 | 大鼠脂酰辅酶A合成酶(ACS)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1062 |
英文名称 | ACS ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测浓度≤0.3ng/mL
检测范围:0.6ng/mL - 80ng/mL
反应时间:总反应120分钟(37℃孵育60min、酶孵育30min、显色30min)
保存条件:2-8℃冷藏保存,试剂开封后分类密封存放
有效期:12个月
检测波长:450nm
标准曲线绘制:四参数Logistic拟合,标准曲线R²≥0.990
注意事项:实验试剂需充分混匀,避免试剂浓度不均导致检测偏差,严格控制孵育时长
试剂盒组成:
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
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实验操作流程:
1. 试剂盒试剂室温平衡 30min,稀释浓缩洗涤液制备工作液,组织样本匀浆离心取上清,准备酶标板划分孔组。
2. 标准品孔上样 50μL 梯度 ACS 标准品,检测孔加入 50μL 待测上清液,空白孔补稀释液。
3. 各孔加入酶标记抗体工作液 100μL,封板密封,37℃恒温孵育 50min。
4. 倒掉孔内液体,洗涤液洗板 6 轮,每轮浸泡 30s,拍干微孔内液体。
5. 避光依次加入显色底物 A、B 各 50μL,混匀后 37℃避光显色 17min。
6. 加入终止液 50μL / 孔,摇晃酶标板混匀终止显色。
7. 450nm 测 OD 值,拟合标准曲线计算 ACS 含量。
关键字: 大鼠脂酰辅酶A合成酶;ACS;ELISA试剂盒;
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