本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附原理，酶标板微孔包被游离睾酮特异性抗原，待测大鼠样本中的F-TESTO与固相包被抗原竞争性结合有限的酶标记特异性抗体，样本中游离睾酮含量越高，结合于固相的酶标抗体越少，底物显色后颜色越浅，通过检测吸光度值，对照竞争法标准曲线，即可定量计算出大鼠样本中游离睾酮的浓度。
基本参数：
产品名称：大鼠游离睾酮(F-TESTO)ELISA试剂盒
英文名称：F-TESTO ELISA Kit
货号：Y-E1614
规格：48T/96T
灵敏度：最低检测浓度0.1pg/mL
检测范围：0.3pg/mL - 50pg/mL
反应时间：全程150分钟（样本孵育90min，酶标孵育30min，显色30min）
保存条件：2-8℃密封避光保存，激素类试剂严禁冷冻
有效期：未开封储存有效期12个月
特异性：专一识别大鼠游离睾酮，与结合睾酮、雌二醇、孕酮无交叉反应
重复性：板内变异系数CV≤4%，板间变异系数CV≤6%
注意事项：样本采集避免剧烈运动干扰激素水平；全程避光操作，防止激素降解；洗涤充分，降低背景值
储存与有效期：
未开封整套试剂盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷冻；有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条：自封袋密封，内置干燥剂 2～8℃避光；1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
浓缩洗涤液：2～30℃常温保存，结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品：分装 - 20℃冻存，避免反复冻融，1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下：
试剂盒常温回温 30min，配制洗涤液，梯度稀释游离睾酮标准品，标记酶标板空白、标准、样本孔。
标准品孔加入梯度 F-TESTO 标准品 50μL，样本孔加入 50μL 大鼠血清上清，空白孔空置。
除空白孔外每孔加入一步法酶结合抗原工作液 100μL，封板密封，37℃孵育 58min。
倒净废液，洗涤液浸润微孔 35s 后甩干，重复洗板 5 次，去除游离未结合组分。
每孔加入显色 A、B 液各 50μL，避光 37℃显色 17min。
滴加终止液 50μL 终止酶促反应，轻微振荡板面。
15min 内 450nm 读数，拟合曲线计算游离睾酮 F-TESTO 含量。
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