本试剂盒依托竞争性ELISA检测原理,针对大鼠VA建立特异性免疫反应体系。酶标板预先包被VA特异性抗原,检测时样本中的VA与固相抗原竞争结合限量的抗VA抗体,结合的抗体可与后续加入的酶标记物反应,未结合的游离物质经洗涤去除。加入底物显色后,样本中VA含量越高,竞争性抑制作用越强,显色深度越弱,吸光度值越低,通过标准曲线比对,可定量测定大鼠样本中维生素A的浓度。
产品参数:
产品名称 | 大鼠维生素A(VA)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1473 |
英文名称 | VA ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测浓度≤0.02μmol/L
检测范围:0.05μmol/L - 2.5μmol/L
反应时间:全程80分钟,孵育50分钟,显色15分钟,终止读数15分钟
保存条件:试剂2-8℃避光保存,维生素A标准品-20℃避光冻存
有效期:原装有效期12个月,标准品解冻后7天内使用
特异性:特异性识别大鼠血清中视黄醇(维生素A),与胡萝卜素、维生素A衍生物交叉反应极低
重复性:板内CV≤5%,板间CV≤7%
注意事项:全程严格避光操作,维生素A见光易分解;样本需空腹采集,饮食会影响检测数值;避免脂血样本,脂质会干扰显色反应。
关键注意事项:
本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
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实验操作流程:
微孔板室温回温,标准品倍比稀释,待测样本预处理稀释,空白孔添加样本稀释液,每孔上样 50μL。
每孔加入 VA 酶结合试剂 50μL,密封酶标板,37℃避光孵育 65min。
洗板 5 次,每次洗液浸润 30s,倒扣拍干所有孔内液体。
每孔加入底物显色液 100μL,室温避光显色 16min。
加入终止液 50μL 终止显色反应。
酶标仪 450nm 测定吸光度值并记录数据。
绘制标准曲线,计算样本稀释后浓度,还原原始样本 VA 浓度。
关键字: 大鼠维生素A;VA;ELISA试剂盒;
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