人纤维连接素相关抗原(FRA)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心ELISA技术原理，微孔板预先包被抗人FRA特异性抗体，可特异性捕获样本与标准品中的FRA抗原，经孵育结合、洗涤去除游离杂质后，加入HRP标记的FRA配对检测抗体，形成固相抗体-抗原-酶标抗体复合物，底物显色后终止反应，检测各孔吸光度，OD值与样本中FRA含量成正比，通过标准曲线即可精准测算FRA浓度。
产品参数：

‌灵敏度：0.22ng/mL

检测范围：0.45-28.8ng/mL

反应时间：室温孵育 100min，酶结合物 62min，显色 19min

保存条件：2～8℃避光存放，显色液 A、B 分开避光存放

显色系统：A 液缓冲基质，B 液显色底物，混合后启动显色

检测波长：450nm 单波长检测

标准曲线绘制：浓度与 OD 值线性拟合，带入方程换算待测浓度

注意事项：耗材需一次性使用，枪头不可重复吸取试剂，防止交叉污染
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。

公司正在出售的产品：

实验操作流程：

试剂盒室温平衡 30min，配制一步法酶结合工作液，区分空白、标准、待测孔。

每孔先加酶工作液 55μL，标准孔加梯度 FRA 标准液 45μL，样本孔加待测上清 45μL，空白孔补缓冲液。

覆膜密封，37℃孵育 63min，倒掉废液，洗板 6 次，每次浸泡 30s，倒扣拍干。

每孔加入 TMB 显色液 100μL 混匀。

避光 37℃显色 19min。

滴加终止液 50μL 终止显色。

酶标仪 450nm 读数，绘制标准曲线定量 FRA。