本试剂盒基于双抗体夹心ELISA检测原理,预先在酶标板微孔包被抗人肿瘤相关抗原特异性抗体,加入标准品和待测样本后,样本中的TAA抗原与固相捕获抗体特异性免疫结合,洗板去除未结合物质,加入酶标记TAA检测抗体形成稳定免疫复合物,底物显色、终止反应后检测吸光度,结合标准曲线定量测定样本中肿瘤相关抗原的含量。
基本参数:

产品名称:人肿瘤相关抗原(TAA)ELISA试剂盒
英文名称:TAA Elisa Kit
货号:Y-E273
规格:48T/96T
灵敏度:最小可测 0.29U/mL
检测范围:0.58U/mL - 37.12U/mL
反应时间:孵育 56min、46min,避光显色 14min
保存条件:试剂盒 2~8℃密封存放,防止试剂挥发失效
显色系统:单组份稳定 TMB 显色液
检测波长:450nm 校正 620nm
标准曲线绘制:剔除异常复孔后拟合标准曲线计算样本抗原含量
注意事项:黄疸、重度溶血血清样本会干扰显色,需稀释复测
储存与有效期:

未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下:

试剂室温回温 30min,倍比稀释 TAA 标准品,胸腹水 / 血清样本稀释待测,对酶标板进行孔位编号标记。
规范加样操作,空白孔加稀释缓冲液,标准孔加梯度 TAA 标准品,样本孔加入待测体液样本。
一步法直接添加酶联抗体工作液至所有微孔,省略分步一抗孵育步骤,轻晃酶板混匀。
封板封口,37℃避光孵育 67min,酶标板单层平放于孵育箱。
弃除孔内液体,洗板液浸泡每孔 28s,重复洗板 5 次并倒扣拍干微孔。
避光加入显色底物,室温避光显色 16min,依据梯度色差确定终止节点。
终止液终止显色,450nm 波长测 OD 值,换算样本 TAA 抗原浓度。
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