本试剂盒基于双抗体夹心ELISA检测原理,酶标板微孔包被人真胰岛素特异性单克隆抗体,加入标准品和待测生物样本后,样本中的真胰岛素抗原与固相抗体特异性结合,洗板去除未结合杂质,加入酶标记真胰岛素检测抗体形成夹心免疫复合物,底物显色、终止反应后,检测各孔吸光度,根据显色强度与TI含量的正相关关系,定量检测样本中真胰岛素浓度。
基本参数:

产品名称:人真胰岛素(TI)ELISA试剂盒
英文名称:TI Elisa Kit
货号:Y-E638
规格:48T/96T
灵敏度:最小检测 0.15μIU/mL
检测范围:0.3μIU/mL - 19.2μIU/mL
反应时间:孵育分三次,32min、32min、12min
保存条件:试剂盒 2~8℃,胰岛素标准品极易失活,开封后尽快用完
显色系统:TMB A、B 液等量混合显色
检测波长:450nm,630nm 校背景
标准曲线绘制:线性回归绘制标准曲线,精准定量胰岛素活性浓度
注意事项:样本严禁高温放置,胰岛素室温放置超 2h 活性大幅下降
关键注意事项:

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
实验步骤如下:

试剂室温平衡 30min,梯度稀释真胰岛素 TI 标准品,空腹血清样本稀释预处理,标记酶标板标准、样本、空白孔。
空白孔加稀释缓冲液,标准孔加梯度 TI 标准液,样本孔加入稀释后血清样本,严格把控加样体积。
一步法直接添加酶标记抗体工作液至所有反应孔,手动混匀板内液体。
封板膜密封,37℃避光孵育 60min,孵育环境避光恒温。
撕开封板倒掉废液,洗板液洗板 5 次,每次浸泡 30s,充分拍干微孔。
避光滴加显色底物 AB 液,37℃避光显色 13min,防止显色过度。
终止液终止显色,450nm 读取 OD 值,标准曲线计算样本真胰岛素含量。
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