本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理,微孔板预先包被抗AAV特异性抗体,能够特异性捕获样本与标准品中的腺相关病毒抗原,孵育充分结合后洗涤去除孔内游离杂质,加入辣根过氧化物酶标记的AAV检测抗体,形成稳定的夹心免疫复合物,底物显色终止后检测吸光度,根据标准曲线精准定量检测样本中AAV的含量。
产品参数:
产品名称 | 人腺相关病毒(AAV)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E558 |
英文名称 | AAV Elisa Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检出 5×10² vg/mL 病毒基因组
检测范围:1×10³~6.4×10⁴ vg/mL
反应时间:样本孵育 105min,检测抗体 70min,显色 20min
保存条件:试剂盒 2-8℃,AAV 参照品 - 20℃冻存分装
显色系统:高灵敏度底物显色,适合低滴度病毒检测
检测波长:450nm 主波长检测
标准曲线绘制:病毒拷贝数对数与吸光度值四参数拟合定量
注意事项:AAV 包装细胞裂解液需稀释合适倍数,过高浓度易出现钩状效应
试剂盒组成:
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
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实验操作流程:
试剂盒室温平衡 31min,配制一步法双夹心酶结合液,设置阳性对照、标准品、样品、空白孔。
每孔先加注酶工作液 60μL,标准 / 对照孔加入对应质控液体 40μL,样本孔加病毒裂解样本 40μL,空白孔加稀释液 40μL。
封板 37℃孵育 57min,倾倒废液,洗板 4 次,每次浸泡 28s,拍干微孔板。
每孔加入 TMB 显色底物 100μL 混匀。
室温避光显色 10min。
快速滴加终止液 50μL 终止反应。
450nm 测 OD 值,判读 AAV 阳性阴性并定量。
关键字: 人腺相关病毒;AAV;ELISA试剂盒;
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