本试剂盒基于固相双抗体夹心酶免疫检测原理,微孔板包被纯化的抗人SBEM特异性抗体,加入标准品及待测样本后,样本中的SBEM抗原与固相抗体发生特异性免疫结合,孵育洗涤除杂后,加入HRP标记的SBEM配对检测抗体,形成三元免疫复合物,经TMB底物显色、酸性液终止反应后,检测各孔吸光度,结合标准曲线测算样本中SBEM的浓度。
产品参数:
产品名称 | 人小乳腺表皮粘蛋白(SBEM)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E2944 |
英文名称 | SBEM ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:0.07ng/mL
检测范围:0.125-8ng/mL
反应时间:37℃孵育 72min,酶标二抗 46min,显色 12min
保存条件:整套试剂 2-8℃,剩余板条密封防潮冷藏
显色系统:增强型 TMB 显色液,背景值极低
检测波长:450nm,600nm 参比校正
标准曲线绘制:线性回归拟合标准曲线,R²>0.99 方可使用
注意事项:乳腺组织石蜡提取样本脱蜡必须彻底,残留二甲苯会完全抑制显色
关键注意事项:
本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
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实验操作流程:
试剂盒室温平衡 23min,稀释一步法酶标一抗液,划分实验孔组别。
各孔预加酶结合液 50μL,标准品孔加梯度 SBEM 标准品 50μL,样品孔加乳腺组织上清 50μL,空白孔加稀释液。
封板 37℃孵育 69min,弃净液体,洗板 5 次,每次浸泡 32s,彻底拍干微孔板。
依次加入显色 A、B 液各 50μL 混匀。
避光 37℃显色 17min。
加入终止液 50μL 终止显色。
450nm 测定 OD,标准曲线计算 SBEM 含量。
关键字: 人小乳腺表皮粘蛋白;SBEM;ELISA试剂盒;
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