人制瘤素M受体(OSMR)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心ELISA核心原理，酶标板微孔包被抗人制瘤素M受体特异性捕获抗体，加入待测样本与标准品后，样本中的OSMR抗原与固相抗体特异性结合，孵育洗涤后加入酶标记OSMR检测抗体，形成稳定的免疫三元复合物，经TMB底物显色、终止反应后检测吸光度，依据标准曲线线性关系定量检测样本中OSMR蛋白含量。
基本参数‌：

产品名称：人制瘤素M受体(OSMR)ELISA试剂盒

英文名称：OSMR  Elisa Kit
货号：Y-E221

规格：48T/96T

灵敏度：最小可测 0.24pg/mL

检测范围：0.48pg/mL - 30.72pg/mL

反应时间：固相捕获 58min，酶标记结合 48min，显色 16min

保存条件：试剂盒 2～8℃密封保存，防止挥发失效

显色系统：TMB A/B 液混合后显色

检测波长：450nm 参比 620nm

标准曲线绘制：采用非线性四参数 Logistic 回归绘制标准曲线

注意事项：细胞上清样本去除死细胞碎片，避免非特异性吸附升高背景值
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

试剂室温回温 29min，倍比稀释 OSMR 标准品，细胞膜裂解上清稀释待测，划分酶标板孔位。

依次向对应孔加入空白稀释液、梯度标准品、待测裂解样本，加样不触碰包被底面。

一步法直接添加酶联抗体工作液至所有微孔，手动混匀板内反应体系。

封板膜封闭酶标板，37℃恒温避光孵育 64min，酶标板不可堆叠。

去除封板倒掉液体，洗板液浸泡每孔 28s，重复洗板 5 次并拍干残留洗液。

避光滴加显色底物 AB 液，室温显色 16min，观察标准品梯度蓝色差异。

终止液终止显色，450nm 读取吸光度，标准曲线换算 OSMR 受体蛋白浓度。
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