人血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，预先将纯化的人ANGPTL3特异性抗体包被于微孔板中，形成固相抗体，向微孔中加入标准品、待测样本，样本中的ANGPTL3抗原会与固相抗体特异性结合，充分洗涤去除未结合物质后，加入酶标记的特异性检测抗体，形成固相抗体-抗原-酶标抗体的免疫复合物，再次洗涤洗去游离酶标抗体，加入底物显色液进行显色反应，在酶的催化下底物发生显色，反应终止后通过酶标仪测定各孔吸光度值，吸光度值与样本中ANGPTL3含量呈正相关，依据标准品绘制的标准曲线即可精准计算出待测样本中ANGPTLᗏ⫬ᗏ
产品参数：

‌灵敏度：最低可检测 0.08ng/mL

检测范围：0.312~20ng/mL

反应时间：样本孵育 60min，二抗孵育 30min，底物显色 15min，总耗时 105min

保存条件：未拆封试剂盒 2~8℃避光储存；开封后板条密封 2~8℃可存 1 个月，浓缩液 - 20℃分装冻存

显色系统：TMB 单组份显色液，酸性终止液终止反应

检测波长：主波长 450nm，参比波长 630nm

标准曲线绘制：以标准品浓度为 X 轴，OD 值为 Y 轴，四参数 Logistic 拟合生成标准曲线

注意事项：血清样本避免反复冻融超过 3 次，溶血严重样本不可使用
关键注意事项：

本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。

全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。

移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。

孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。

洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。

终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。

终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。

实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。

不同批次试剂盒组分不可混用。

试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。

公司正在出售的产品：

实验操作流程：

样本稀释处理：血清 / 血浆样本按试剂盒说明书推荐稀释比例用样本稀释液梯度稀释，充分涡旋混匀，室温静置 5min 备用；提前取出酶标板、试剂盒所有组分室温平衡 30min。

加样孵育：设置空白孔、标准品孔、待测样本孔，每孔同步加入对应浓度标准品、稀释后待测样本，再加入酶结合工作液，封板膜密封酶标板，37℃恒温孵育 60min。

洗板操作：揭去封板膜，弃去孔内液体，每孔加满洗涤缓冲液，浸泡 30s 后甩干，重复洗板 5 次，最后一次洗板后将酶标板倒扣在吸水纸上彻底拍干残留液体。

底物显色：每孔依次加入显色液 A 液、显色液 B 液，轻柔震荡酶标板 10s 混匀，避光环境下 37℃避光显色 15min。

终止反应：显色时间到达后，每孔快速加入终止液终止酶促显色反应，轻晃酶标板确保孔内液体完全混匀。

吸光度检测：15min 内使用酶标仪，设定检测波长 450nm，读取各孔 OD 吸光度数值并逐一记录。

结果计算判定：依据标准品浓度与对应 OD 值绘制标准曲线，代入样本 OD 值换算样本原始浓度，结合稀释倍数计算样本最终 ANGPTL3 含量，出具实验数据记录。