本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附原理,将抗人TRANCE特异性抗体包被于酶标板微孔作为固相载体,加入标准品和待测样本后,样本中的肿瘤坏死因子相关激活诱导因子与固相抗体特异性结合,洗板去除未结合组分,加入HRP标记检测抗体形成夹心复合物,显色深浅与TRANCE含量正相关,终止反应后检测吸光度,通过标准曲线定量检测样本中目标因子含量。
基本参数:

产品名称:人肿瘤坏死因子相关激活诱导因子(TRANCE)ELISA试剂盒
英文名称:TRANCE Elisa Kit
货号:Y-E035
规格:48T/96T
灵敏度:检测限 0.15pg/mL
检测范围:0.3pg/mL - 19.2pg/mL
反应时间:一抗孵育 40min,二抗 40min,显色 15min
保存条件:试剂盒全程 2-8℃,不可置于冰箱冷冻层
显色系统:即用型 TMB 显色底物
检测波长:450nm 参比 650nm
标准曲线绘制:复孔检测标准品,计算均值后绘制标准曲线
注意事项:骨组织样本匀浆后过滤去除钙化颗粒,防止堵孔洗板不全
关键注意事项:

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
实验步骤如下:

试剂盒室温静置 30min,梯度稀释 TRANCE 标准品,细胞培养上清样本稀释待测,标注酶标板各孔信息。
垂直加样至对应微孔,空白孔加稀释液,标准孔加梯度 TRANCE 标准品,样本孔加待测上清。
直接向全部微孔加入酶标记抗体工作液,低速震荡酶标板 15s 混匀。
封板封口后 37℃避光孵育 68min,全程不可开启封板。
弃去孔内废液,洗板液洗板 5 次,每次浸泡 30s,吸水纸彻底拍干微孔。
避光添加 TMB 显色液,37℃避光显色 16min,梯度色差清晰后终止。
加入终止液终止反应,酶标仪 450nm 读数,计算 TRANCE 因子含量。
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