本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附技术原理，酶标板微孔固定人肿瘤血管生长因子特异性捕获抗体，加入不同浓度标准品和待测样本后，样本中的TAF与固相抗体特异性结合，孵育洗涤后加入HRP标记的TAF检测抗体，构建固相抗体-抗原-酶标抗体复合物，显色深浅与TAF含量成正比，通过标准曲线精准定量样本中目标因子浓度。
基本参数：
产品名称：人肿瘤血管生长因子(TAF)ELISA试剂盒
英文名称：TAF Elisa Kit
货号：Y-E275
规格：48T/96T
灵敏度：检测限 0.09ng/mL
检测范围：0.18ng/mL - 11.52ng/mL
反应时间：一抗 34min，二抗 34min，显色 12min
保存条件：2-8℃避光，剩余板条必须密封防潮
显色系统：TMB 双液配比显色体系
检测波长：450nm
标准曲线绘制：四参数模型绘制标准曲线，适配宽浓度梯度样本
注意事项：组织灌注液样本需过滤去除微小组织碎屑，避免吸附微孔板
试剂盒组成：
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点
辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：
试剂盒室温放置 29min，梯度稀释 TAF 标准品，肿瘤组织匀浆上清稀释制备待测液，标注酶标板微孔类型。
向空白、标准、样本孔精准加样，统一加样体积，避免液体挂壁损耗。
直接向全部微孔加入酶标记抗体工作液，低速震荡混匀 10s。
封板膜密封酶标板，37℃恒温避光孵育 64min，避光环境孵育。
倒掉孔内废液，洗板液洗板 4 次，每次浸泡 35s，吸水纸吸干微孔残留洗涤液。
避光滴加 TMB 显色液，37℃避光显色 15min，观察显色梯度区分度。
终止液终止反应，酶标仪 450nm 读数，绘制标准曲线计算 TAF 含量。
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