本试剂盒依托双抗体夹心ELISA检测原理，酶标板微孔固定抗人MHCⅡ类分子特异性抗体，加入梯度标准品和待测样本后，样本中的主要组织相容性复合体Ⅱ类抗原与固相抗体特异性结合，洗板去除未结合组分，加入HRP标记检测抗体构建夹心免疫结构，显色深浅与MHCⅡ含量成正比，通过标准曲线拟合完成定量检测。
基本参数：
产品名称：人主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)ELISA试剂盒
英文名称：MHCⅡ/HLA-Ⅱ ELISA Kit
货号：Y-E2875
规格：48T/96T
灵敏度：检测限 0.30ng/mL
检测范围：0.6ng/mL - 38.4ng/mL
反应时间：固相结合 54min，酶标孵育 44min，显色 20min
保存条件：试剂盒全程 2-8℃，不可冷冻
显色系统：单组份稳定 TMB 显色液
检测波长：450nm 参比 650nm
标准曲线绘制：四参数 Logistic 拟合标准曲线，适配高低表达样本
注意事项：抗原提呈细胞样本需去除外源性抗原杂质，避免竞争抑制抗体结合
试剂盒组成：
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点
辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：
试剂盒室温平衡 32min，倍比稀释 MHCⅡ 标准品，抗原呈递细胞裂解上清稀释待测，标注酶标板孔位信息。
无菌操作加样，空白孔加无菌稀释液，标准品孔依次添加梯度 MHCⅡ 标准溶液，样本孔加入待测细胞上清。
一步法直接添加酶联抗 MHCⅡ 抗体工作液至所有反应孔，手动混匀酶标板。
无菌封板封口，37℃湿盒避光孵育 70min，恒温恒湿孵育。
去除封板倒掉孔内液体，无菌洗板液浸泡每孔 29s，重复洗板 5 次并拍干微孔。
避光加入 TMB 显色液，室温避光显色 18min，梯度色差清晰后终止反应。
终止液终止显色，450nm 波长测定 OD 值，换算样本 MHCⅡ 蛋白浓度。
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