本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，微孔板固相固定有小鼠主要组织相容性复合体Ⅱ类（MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ）特异性抗体。检测时，样本、标准品中的MHC-Ⅱ抗原与固相捕获抗体特异性结合，洗去未结合的非特异性物质后，加入HRP标记的配对检测抗体，构建固相抗体-抗原-酶标抗体免疫复合物。再次洗涤后加入TMB底物进行酶促显色，显色强度与样本中MHC-Ⅱ抗原含量成正比，终止反应后测定吸光度，对照标准曲线即可完成定量检测。
基本参数：
产品名称：小鼠主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHC-Ⅱ/H-2ⅡELISA试剂盒
英文名称：MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ ELISA Kit
货号：Y-E2092
规格：48T/96T
灵敏度：最低检出 0.16ng/mL
检测范围：0.32ng/mL～31ng/mL
反应时间：37℃温育 96min，酶标记物 56min，避光显色 22min，终止读数，总时长 174min
保存条件：整套试剂盒 2～8℃避光；浓缩洗涤液常温长期储存无变质风险
显色系统：双组份配比混合 TMB 显色体系
检测波长：450nm+650nm 双波长校正
标准曲线绘制：半对数坐标绘制标准曲线，用于样本定量换算
注意事项：抗原提呈细胞裂解样本去除核酸杂质；加样不可产生气泡遮挡光路。
关键注意事项：
本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。
终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。
终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。
实验步骤如下：
试剂盒室温放置 32min 平衡温度，稀释浓缩洗涤液，配制 H-2Ⅱ 标准梯度液。
酶标板分孔精准加样标准品、免疫细胞上清样本、空白对照。
直接加入酶标记结合工作液，封板 37℃孵育 62min。
洗板 4 次，浸泡 29s / 轮，弃净废液拍干微孔。
避光显色底物反应 16min。
加入终止液终止反应，震荡酶标板混匀。
检测 OD 值，拟合曲线定量 MHC-Ⅱ 含量。
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