本试剂盒依托双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理,微孔板预先包被抗人PAIg特异性抗体,加入待测血小板样本及标准品,样本中的PAIg与固相抗体特异性结合,洗涤去除未结合组分,加入酶标记检测抗体形成免疫复合物,洗涤纯化体系后进行底物显色,终止反应后测定吸光度,依据标准曲线线性关系,定量检测样本中PAIg的含量水平。
产品参数:
产品名称 | 人血小板相关免疫球蛋白(PAIg)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E2795 |
英文名称 | PAIg ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最小检出 0.1μg/10⁷血小板
检测范围:0.4~25.6μg/10⁷血小板
反应时间:样本孵育 75min,二抗 40min,显色 18min,合计 133min
保存条件:试剂盒 2~8℃,底物液单独避光存放
显色系统:单组分 TMB 显色,盐酸终止
检测波长:450nm 主波长,600nm 参比
标准曲线绘制:七点倍比稀释,四参数拟合标准曲线
注意事项:血小板计数需精准,否则最终浓度换算存在巨大误差
关键注意事项:
实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
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实验操作流程:
血小板处理上清稀释:样本上清用稀释液稀释混匀,室温静置 10min;试剂室温平衡 32min。
加样密封孵育:各微孔加入标准品、待测样本与酶结合工作液,覆膜封口,37℃孵育 62min。
洗板流程:洗涤液浸泡微孔 35s,洗板 5 次,倒扣拍干微孔内液体。
底物显色:加入显色 A、B 液避光混匀,37℃显色 15min。
终止显色反应:准时加入终止液轻摇混匀。
光度检测:450nm 波长测定 OD 值并逐条登记。
结果计算:绘制标准曲线换算稀释倍数,得到 PAIg 检测数值。
关键字: 人血小板相关免疫球蛋白;PAIg;ELISA试剂盒;
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