本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，酶标板微孔固相包被人转录因子抗体-1特异性捕获抗体，加入标准品及待测样本后，样本中的ATF-1抗原与固相抗体特异性结合，洗板去除未结合物质，加入HRP标记的ATF-1检测抗体形成免疫复合物，经显色、终止反应后检测吸光度，依据标准曲线线性关系定量检测样本中ATF-1的含量。
基本参数：
产品名称：人转录因子抗体-1(ATF-1)ELISA试剂盒
英文名称：ATF-1 ELISA Kit
货号：Y-E2665
规格：48T/96T
灵敏度：检测限 0.21pg/mL
检测范围：0.42pg/mL - 26.88pg/mL
反应时间：一抗 45min，二抗 35min，显色 16min
保存条件：2-8℃密封储存，底物液遮光放置
显色系统：即用型 TMB 显色液
检测波长：450nm
标准曲线绘制：双复孔取均值，构建标准曲线换算转录因子浓度
注意事项：核蛋白提取需彻底去除胞质杂质，避免杂蛋白竞争结合位点
关键注意事项：
实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）
避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果
显色过程需避光，避免阳光直射影响结果
实验步骤如下：
试剂盒室温静置 33min，梯度稀释 ATF-1 标准品，细胞核蛋白提取液稀释待测，标注酶标板微孔类型。
规范加样操作，空白孔添加样本稀释液，标准品孔依次加入梯度 ATF-1 标准品，样本孔加入待测核蛋白样本。
一步法直接添加酶联抗 ATF-1 抗体工作液至所有微孔，低速震荡酶标板 12s 混匀。
封板膜密封酶标板，37℃避光孵育 70min，全程避光存放孵育。
倒掉孔内反应废液，洗板液浸泡每孔 28s，重复洗板 5 次并吸水纸拍干微孔。
避光加入显色底物混合液，室温避光显色 17min，依据颜色梯度确定终止节点。
终止液终止显色，450nm 波长读取吸光度，拟合标准曲线计算 ATF-1 转录因子浓度。
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