本试剂盒基于双抗体夹心ELISA技术检测人样本中八聚体转录因子(OTF2A)含量。微孔板表面包被OTF2A特异性捕获抗体,加入待测样本后,样本中的OTF2A抗原与固相抗体特异性免疫结合,经洗涤去除游离杂质。加入HRP标记的OTF2A检测抗体,形成完整的夹心免疫复合物,洗涤后加入TMB显色底物,在酶的催化下发生显色反应,终止反应后通过酶标仪检测吸光度。显色强度与样本中OTF2A浓度呈正相关,对照标准曲线可完成精准定量检测。
产品参数:
产品名称 | 人八聚体转录因子(OTF2A)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E2611 |
英文名称 | OTF2A ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:≤7pg/mL
检测范围:25pg/mL–1400pg/mL
反应时间:封闭后样本孵育 90min,二抗 50min,避光显色 19min
显色系统:单组份 TMB 底物
检测波长:450nm
特异性:特异性绑定 OTF2A 亚型,不识别 OTF2B
重复性:板内 CV≤5.6%,板间 CV≤7.7%
注意事项:组织匀浆样本需去除脂质层后再稀释上样
关键注意事项:
本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
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实验操作流程:
试剂盒室温放置 26min 回温,取出酶标板固定于板架,编号标记各类反应孔。
标准品孔加入系列稀释 OTF2A 标准品 50μL;样本孔加入核蛋白提取稀释样本 50μL;空白孔不加液。
检测孔加入一步法酶偶联一抗工作液 50μL,轻晃酶板混匀,覆膜密封微孔。
37℃恒温孵育 57min,全程酶标板不可倾斜移位。
弃除孔内液体,洗板液浸泡 30s 后拍干,重复洗板 4 次。
每孔添加显色 A 液、B 液各 50μL,避光混匀,37℃避光显色 13min。
滴加终止液 50μL 终止反应,混匀后 10min 内 450nm 读数,依据标准曲线计算 OTF2A 浓度。
关键字: 人八聚体转录因子;OTF2A;ELISA试剂盒;
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