本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理,微孔板预先包被人AP特异性抗体,加入梯度标准品和待测生物样本,样本中的抑肽酶抗原与固相抗体特异性结合,洗涤去除未结合杂质,加入酶标记AP检测抗体形成稳定的夹心免疫复合物,二次洗涤纯化体系后显色、终止反应,检测吸光度并通过标准曲线定量样本中AP的含量。
产品参数:
产品名称 | 人抑肽酶(AP)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E926 |
英文名称 | AP Elisa Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:检出限 0.05ng/mL
检测范围:0.156~10ng/mL
反应时间:样本孵育 65min,二抗 50min,显色 16min,总 131min
保存条件:2~8℃冷藏,开封试剂瓶口密封防止挥发浓缩
显色系统:OPD 底物显色硫酸终止
检测波长:492nm 单波长检测
标准曲线绘制:六点梯度浓度,直线回归生成标准曲线
注意事项:体外添加抑肽酶抗凝的样本会导致检测结果严重偏高
关键注意事项:
实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
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实验操作流程:
血浆样本稀释处理:抗凝血浆稀释配比混匀,室温静置 11min;试剂盒组分室温平衡 34min。
一步法加样免疫孵育:空白、标准、样本孔加样与酶标记液,封板 37℃孵育 65min。
洗板流程:洗涤液浸泡微孔 35s,洗板 5 次,彻底拍干微孔内残留液体。
避光显色:加入显色混合底物液,避光 37℃显色 15min。
终止显色:滴加终止液轻摇混匀反应体系。
吸光度测定:450nm 检测各孔 OD 值按编号记录。
浓度核算:拟合标准曲线换算稀释倍数,得到抑肽酶 AP 含量。
关键字: 人抑肽酶;AP;ELISA试剂盒;
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