人α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，微孔板固相包被人α2抗纤溶酶（α2-AP）特异性捕获抗体，孵育时待测样本、标准品中的α2-AP抗原与固相抗体特异性结合，洗涤去除残留杂质后，加入辣根过氧化物酶标记的α2-AP检测抗体形成稳定免疫复合物，经充分洗涤后底物显色，终止反应后测定吸光度，依据吸光度与抗原浓度的正相关关系实现定量检测。
基本参数‌：

产品名称：人α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISA试剂盒

英文名称：α2-AP Elisa Kit
货号：Y-E3016

规格：48T/96T

1.灵敏度：检出限≤5ng/mL

2.检测范围：10ng/mL - 320ng/mL

3.反应时间：捕获 72min，二抗 41min，显色 14min

4.显色系统：A 液缓冲体系 + B 液 TMB 显色

5.检测波长：450nm+620nm

6.特异性：专一结合 α2-AP 纤溶酶抑制结构域，不干扰纤溶酶原检测

7.重复性：批内 CV≤6.1%，批间 CV≤8.7%

8.注意事项：凝血样本需充分凝固，未完全凝血血清会出现假阳性偏高
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

1. 试剂盒室温回温 28min，稀释浓缩洗涤液，标准品溶解稀释，血浆样本轻柔混匀避免凝血。

2. 标记酶标板孔位，标准孔加入对应浓度标准品 50μL，样本孔加入待测血浆 50μL，空白孔空置。

3. 非空白孔每孔添加酶标记结合液 100μL，封板密封，小幅晃动酶标板混匀液体。

4. 37℃避光孵育 54min，酶标板平放于孵育箱内。

5. 倒出孔内液体，洗涤液浸泡 28s 甩干，循环洗板 4 次，吸干板孔残留洗涤液。

6. 避光依次加入显色 A、B 液各 50μL，轻微震荡，37℃避光显色 16min。

7. 终止液终止反应，酶标仪检测吸光度，拟合标准曲线定量 α2-AP 浓度。
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