本试剂盒基于双抗体夹心ELISA检测原理,微孔板预先包被人INH特异性捕获抗体,加入标准品与待测血清样本,样本中的抑制素抗原与固相抗体特异性结合,洗涤去除游离组分,加入酶标记INH检测抗体构建免疫复合物,充分洗涤后进行酶促显色反应,终止显色后检测吸光度,结合标准曲线精准定量样本中INH的浓度水平。
产品参数:
产品名称 | 人抑制素(INH)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E192 |
英文名称 | INH Elisa Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测 0.08pg/mL
检测范围:0.312~20pg/mL
反应时间:样本结合 80min,酶二抗 40min,显色 19min,总 139min
保存条件:2~8℃避光,微孔板避免重压导致包被层脱落
显色系统:双组份 TMB 混合显色体系
检测波长:450nm 为主波长,600nm 参比
标准曲线绘制:七点倍比稀释,四参数拟合标准曲线
注意事项:性激素节律周期会影响体内抑制素水平,建议固定采血时段
通用注意事项:
样本要求
血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸;组织匀浆充分离心去除沉淀;样本分装冻存,反复冻融≥3 次会导致抗原降解,检测值偏低。
温度控制
孵育温度严格 37℃,温箱温度波动、室温过低会降低结合效率,背景升高、重复性变差。
避光操作
TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化,显色全程避光,试剂避光存放。
洗板规范
洗涤不充分会造成高背景、假阳性;拍干时使用干净吸水纸,禁止交叉污染微孔。
污染防控
实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶;枪头一次性更换,标准品与样本避免交叉加样;底物液变色、出现沉淀不可使用。
安全防护
终止液含稀硫酸,具有腐蚀性,避免接触皮肤、黏膜;实验废液集中收集中和后处理,不可直接倾倒。
失效判定
试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异,均判定失效,禁止继续实验。
稀释校正
样本 OD 值高于最高标准孔时,必须稀释重测,最终结果乘以稀释倍数;低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。
空白对照
空白孔吸光度应极低,若空白孔 OD>0.1,说明洗涤不充分或试剂污染,实验作废重做。
储存禁忌
试剂盒不可冷冻结冰,冷冻会造成酶标抗体蛋白变性,直接导致试剂盒完全失效。
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实验操作流程:
血清样本梯度稀释:育龄期血清样本稀释涡旋混匀,室温静置 7min;试剂盒室温复温 26min。
加样密封孵育:微孔加入标准品、待测血清与酶工作液,覆膜封口,37℃孵育 59min。
微孔洗涤:弃液洗涤浸泡 30s,洗板 4 次,吸水纸拍干微孔废液。
底物显色:加入显色双液避光混匀,37℃显色 13min。
终止反应:添加终止液终止显色并摇匀。
仪器读取 OD:450nm 波长检测吸光度数值存档。
激素定量:标准曲线计算样本 INH 激素浓度。
关键字: 人抑制素;INH;ELISA试剂盒;
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