本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法原理，酶标板微孔内包被有小鼠CD19分子特异性捕获抗体。检测时，样本、标准品中的小鼠CD19抗原与固相捕获抗体特异性结合，洗去未结合杂质后，加入HRP标记的小鼠CD19检测抗体，形成固相抗体-抗原-酶标抗体免疫复合物。充分洗涤去除游离酶标抗体后，加入TMB底物进行酶促显色，显色深浅与样本中CD19分子含量成正比，终止反应后测定吸光度值，依据标准曲线即可定量计算样本中小鼠CD19分子的浓度。
基本参数：
产品名称：小鼠CD19分子(CD19)ELISA试剂盒
英文名称：CD19 ELISA Kit
货号：Y-E2035
规格：48T/96T
灵敏度：最小检出 0.09ng/mL
检测范围：0.18ng/mL～35ng/mL
反应时间：37℃样本孵育 70min，酶结合物 42min，底物显色 14min，终止后立即读数，全程 126min
保存条件：试剂盒 2～8℃冷藏，禁止冷冻；未用完板条密封加干燥剂 2～8℃可存放 10 天
显色系统：预制单组分 TMB 显色液
检测波长：450nm 主波长，620nm 校正
标准曲线绘制：六参数拟合标准曲线，标准品设置复孔，偏差大于 15% 该孔作废重测
注意事项：脾脏淋巴细胞裂解样本需充分离心去除细胞碎片；所有操作避免气溶胶交叉污染。
关键注意事项：
本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。
终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。
终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。
实验步骤如下：
试剂盒室温平衡 22min，稀释洗涤液至使用浓度，倍比稀释小鼠 CD19 标准品。
酶标板设置标准孔、待测细胞裂解液样本孔、空白孔，垂直缓慢加样减少气泡。
直接加入酶标记检测抗体，覆膜封板，37℃避光孵育 58min。
揭膜弃液，洗板 6 次，每次注满洗液静置 25s，倒扣拍干微孔。
加入显色工作液，避光显色 13min。
加入终止液终止反应，轻震酶标板混匀。
450nm 测 OD 值，计算样本 CD19 蛋白浓度。
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