本试剂盒运用间接ELISA检测原理,将纯化的小鼠小核糖核蛋白/Sm(snRNP/Sm)抗原包被于酶标板微孔内。检测时,样本中的抗snRNP/Sm抗体可与固相抗原特异性结合,洗涤去除未结合杂质后,加入辣根过氧化物酶标记的抗小鼠IgG二抗,与样本特异性抗体结合。后续加入TMB底物发生酶促显色反应,显色强度与样本中目标抗体的含量正相关,终止反应后检测吸光度,对照标准曲线即可完成样本中抗体的定量检测。
基本参数:

产品名称:小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗体(snRNP/Sm)ELISA试剂盒
英文名称:snRNP/Sm ELISA Kit
货号:Y-E2028
规格:48T/96T
灵敏度:最低检出 1.0AU/mL
检测范围:2.0AU/mL~180AU/mL
反应时间:封闭后加样孵育 130min,二抗 75min,避光显色 32min,终止读板,总时长 237min
保存条件:整套试剂盒 2~8℃避光;显色液单独避光存放,不可接触金属离子
显色系统:A+B 混合 TMB 显色,硫酸终止
检测波长:450nm+650nm
标准曲线绘制:五点定标法绘制标准曲线,复孔 CV 值小于 10% 方可采信
注意事项:自身免疫血清样本建议新鲜采集检测;一次性枪头杜绝交叉加样。
试剂盒组成:

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下:

试剂盒室温放置 27min 平衡温度,稀释洗涤液,准备 Sm 抗体阳性梯度标准品。
酶标板加样标准品、待测小鼠血清样本、阴性对照孔。
直接加入酶标记二抗工作液,封板避光 37℃孵育 53min。
洗板 4 次,浸泡 34s / 次,弃净废液拍干。
显色底物避光反应 15min。
终止液终止酶促反应,轻摇酶标板。
读板定量样本中抗 Sm 抗体水平。
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