该试剂盒专门用于葡萄糖苷曼氏杆菌的核酸分子检测,靶向该菌株特有基因片段构建PCR扩增体系,可精准识别样本中的目标病原菌。产品操作便捷、检测周期短、结果稳定性高,可有效区分葡萄糖苷曼氏杆菌与其他曼氏杆菌及常见呼吸道致病菌,适用于畜禽呼吸道、组织样本中该菌的感染筛查、病例确诊及养殖环境病原污染检测。
产品名称 | 葡萄糖苷曼氏杆菌PCR检测试剂盒 | 货号 | YS-P014398 |
英文名称 | Mannheimia glucosidaPCR | 规格 | 50T |
有效期 | 12个月 | 保存 | -20℃保存 |
基础原理:

分离呼吸道样本菌体,提取 DNA,引物识别葡萄糖苷曼氏杆菌葡萄糖苷酶编码特异性基因扩增。
扩增产物经特异性限制性内切酶酶切,酶切片段条带特征区分该菌与其他曼氏杆菌。
阴性对照采用无菌缓冲液同步操作,验证试剂、耗材无曼氏杆菌核酸污染。
操作步骤:

样本处理(样本处理区)
推荐使用磁珠法或离心柱法提取核酸,避免交叉污染。
试剂配制(试剂准备区)
反应体系(20μL/管):19μL反应液 + 1μL酶液,分装后加入5μL待测核酸或质控品。
PCR扩增(核酸扩增区)
循环参数:
预变性:95℃ 2min(1循环);
扩增:95℃ 15sec → 60℃ 30sec(45循环,60℃时采集荧光信号,FAM通道)。
结果分析
阳性:Ct值≤40,扩增曲线呈指数增长;
阴性:无Ct值或曲线平直;
可疑:40<Ct≤45,需复测确认。
质控要求:阳性质控Ct≤32,阴性质控无扩增。
注意事项:

所有试剂避免反复冻融,可分装小体积冻存;融化后冰上放置不超过 2 h,酶失活会直接导致无扩增条带
阳性质粒拷贝数极高,开盖全程在生物安全柜操作,防止气溶胶污染实验室
所有耗材必须无核酸酶,枪头一次性使用;实验后 PCR 管、废液 121℃高压灭菌后丢弃
试剂盒出现浑浊、变色、结冰分层、过期禁止使用
仅限科研检测,严禁用于人体临床疾病诊断、食品出厂检疫等合规检测场景
土壤、粪便、腐殖质样本优先使用磁珠法提取核酸,减少抑制剂干扰
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关键字: 葡萄糖苷曼氏杆菌;PCR检测试剂盒;
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