产品名称:转轮蟹通用PCR检测试剂盒
英文名称:Ixoides spp.PCR
货号:YS-P014342
分类:PCR检测试剂盒
规格:50T/盒
检测原理:蟹鳃组织研磨裂解,去除甲壳多糖纯化蟹基因组 DNA
通用引物靶向蟹线粒体 COI 保守基因,识别各类转轮蟹品种
终点 PCR 电泳,根据目标条带确认样本属于转轮蟹属生物实验流程:样本处理(样本处理区)
推荐使用磁珠法或离心柱法提取核酸,避免交叉污染。
试剂配制(试剂准备区)
反应体系(20μL/管):19μL反应液 + 1μL酶液,分装后加入5μL待测核酸或质控品。
PCR扩增(核酸扩增区)
循环参数:
预变性:95℃ 2min(1循环);
扩增:95℃ 15sec → 60℃ 30sec(45循环,60℃时采集荧光信号,FAM通道)。
结果分析
阳性:Ct值≤40,扩增曲线呈指数增长;
阴性:无Ct值或曲线平直;
可疑:40<Ct≤45,需复测确认。
质控要求:阳性质控Ct≤32,阴性质控无扩增。
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注意事项:所有试剂避免反复冻融,可分装小体积冻存;融化后冰上放置不超过 2 h,酶失活会直接导致无扩增条带
阳性质粒拷贝数极高,开盖全程在生物安全柜操作,防止气溶胶污染实验室
所有耗材必须无核酸酶,枪头一次性使用;实验后 PCR 管、废液 121℃高压灭菌后丢弃
试剂盒出现浑浊、变色、结冰分层、过期禁止使用
仅限科研检测,严禁用于人体临床疾病诊断、食品出厂检疫等合规检测场景
土壤、粪便、腐殖质样本优先使用磁珠法提取核酸,减少抑制剂干扰
上海研生实业有限公司
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