本试剂盒依托PCR分子检测技术,针对莱氏泰勒虫保守核酸序列优化扩增体系,可精准检测反刍动物血液样本中的莱氏泰勒虫核酸。试剂盒特异性优异,可精准区分莱氏泰勒虫与泰勒虫属其他亚型病原,灵敏度高,可检出微量虫体核酸,适用于牧区牛羊泰勒虫亚型鉴别诊断、病原分型研究、区域性疫病分布监测。
产品名称 | 莱氏泰勒虫PCR检测试剂盒 | 货号 | YS-P014832 |
英文名称 | Theileria lestoquardiPCR | 规格 | 50T |
有效期 | 12个月 | 保存 | -20℃保存 |
基础原理:

裂解蜱叮咬动物的血液样本,释放莱氏泰勒虫原虫基因组 DNA;
采用莱氏泰勒虫特异性引物对其 18S rRNA 基因片段进行扩增;
根据扩增条带是否存在,判定样本莱氏泰勒虫核酸阳性或阴性。
操作步骤:

1. DNA提取(样本制备区)
使用自选方法或兼容试剂盒提取样本DNA,建议浓度≥10 ng/μL,A260/A280比值1.8-2.0。
2. 标准曲线制备(独立操作区)
标记6管为梯度稀释点(如7-2),每管加45 μL DEPC水。
取5 μL阳性对照依次稀释,混匀后作为标准品(避免污染)。
3. PCR反应体系配制(试剂配制区)
按以下比例配制(示例):
| 组分 | 体积(μL) |
| 2× Master Mix | 10 |
| 引物混合液 | 2 |
| DNA模板 | 2 |
| DEPC水 | 6 |
4. 上机检测
程序设置:预变性95℃ 3 min;40循环(95℃ 10 s, 60℃ 30 s);熔解曲线分析。
数据分析:根据Ct值及标准曲线计算样本浓度。
注意事项:

试剂盒含生物源性质粒模板,操作全程佩戴手套、口罩,阳性模板仅在生物安全柜开盖;
所有一次性耗材、PCR 废液、电泳凝胶实验后 121℃高压灭菌再丢弃;
试剂避免反复冻融,单次融化冰上放置不超过 2 h,使用完毕立即放回 - 20℃;
移液器吸头一次性使用,禁止重复吸取,防止交叉污染;
试剂盒仅用于科研检测,严禁人临床体外诊断;
扩增产物区产物不可带回试剂、提取区,防止气溶胶大面积污染实验室;
若阴性对照持续出现杂带,全部更换全新试剂盒,实验室台面、移液器紫外过夜消毒。
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